[發明專利]一種彈性蛋白的制備工藝在審
| 申請號: | 201810369136.8 | 申請日: | 2018-04-23 |
| 公開(公告)號: | CN108517341A | 公開(公告)日: | 2018-09-11 |
| 發明(設計)人: | 安航;安德榮 | 申請(專利權)人: | 西安德氏禾本生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12P21/06 | 分類號: | C12P21/06;C07K14/78;C07K1/34 |
| 代理公司: | 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491 | 代理人: | 趙紅霞 |
| 地址: | 710003 陜西省西安市蓮湖區*** | 國省代碼: | 陜西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 彈性蛋白 韌帶 制備工藝 彈性蛋白酶 半透膜 氯化鈉 超過濾裝置 超聲波處理 活性炭脫色 磷酸緩沖液 多層紗布 取上清液 震蕩培養 活性高 上清液 絞碎 濾渣 水中 透膜 洗凈 制備 化妝 過濾 | ||
1.一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于,包括以下步驟:
第一步、將韌帶洗凈絞碎后與磷酸緩沖液混合均勻得到韌帶溶液,在韌帶溶液中加入彈性蛋白酶;
第二步、將加入彈性蛋白酶后的韌帶溶液每1L溶液中加入8.5gNaCl,然后進行超聲波處理,并且在25℃條件下震蕩培養2h;
第三步、將第二步處理后的韌帶溶液通過多層紗布過濾并棄去濾渣,將濾液經過活性炭脫色后置于超過濾裝置中通過半透膜;
第四步、將半透膜濾過后的彈性蛋白收集后溶于純水中,調節pH值至9.5,靜置30min,在轉速為15000r/min的條件下離心分離15min,取上清液;
第五步、將第四步所得上清液置于超過濾裝置中通過半透膜。
2.根據權利要求1所述的一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于:在所述第二步中,超聲波處理的超聲強度為0.4W/cm2,頻率為50KHz,功率為140W,超聲處理時間為20min。
3.根據權利要求1所述的一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于:在所述第二步中,震蕩培養的轉速為100~120r/min。
4.根據權利要求1所述的一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于:在所述第三步中,超過濾裝置內的韌帶溶液是在空氣壓力為5.05×105Pa的條件下下通過半透膜。
5.根據權利要求1所述的一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于:在所述第五步中,超過濾裝置中的上清液是在空氣壓力為5.05×105Pa的條件下下通過半透膜。
6.根據權利要求1、4和5中的任意一個權利要求所述的一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于:所述半透膜為硝酸纖維素膜。
7.根據權利要求1所述的一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于:所述第三步、第四步和第五步中的環境溫度均為4℃。
8.根據權利要求1所述的一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于:在第一步中,所述磷酸緩沖液pH值為7.8±0.5。
9.根據權利要求1所述的一種彈性蛋白的制備工藝,其特征在于:所述第一步中,彈性蛋白酶的加入量為每100g韌帶溶液中加入1g彈性蛋白酶。
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