[發明專利]一種篩選異種移植供體豬最佳基因組合的方法

在審

• 申請號: 201810362449.0
• 申請日: 2018-04-20
• 公開（公告）號: CN108342491A
• 公開（公告）日: 2018-07-31
• 發明（設計）人: 魏紅江;趙紅業;角德靈;李鴻輝;趙恒
• 申請（專利權）人: 云南農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888
• 代理公司: 北京名華博信知識產權代理有限公司 11453
• 代理人: 李中強

本發明涉及一種篩選異種移植供體豬最佳基因組合的方法，屬動物生物技術領域。以人成纖維細胞為研究對象，建立人成纖維細胞體外相容性評價方法，用此方法驗證已報道的心臟或其他移植存活時間長的基因修飾豬成纖維細胞的結果，篩出更適合的補體調節因子、免疫應答因子及抗凝血因子，在GTKO的基礎上，對上述因子組合后進行定點敲入或敲除，再對不同多因子組合的豬成纖維細胞用此方法進行早期篩選，獲得3種以上最佳基因組合的細胞再克隆，克隆豬進行豬?非靈長類的心臟移植驗證此篩選方法的可靠性。本發明不需在獲得基因組合修飾豬的基礎上即可評價最佳基因組合，將極大地節約基因組合篩選時間和經費投入，對開發真正的異種移植供體豬具有重大的意義。

技術領域

本發明屬于動物生物技術領域，具體地說，涉及一種篩選異種移植供體豬最佳基因組合的方法。

背景技術

器官移植作為治療終末端器官衰竭患者的一種比較有效方法，在臨床上得到了廣泛應用。然而，這也使得人類器官供體缺乏的狀況越來越嚴重。據美國器官獲取和移植網絡（Organ Procurement and Transplantation Network, OPTN，http://optn.transplant.hrsa.gov/data/）2016年8月11日公布的數據顯示，美國本土有134559例的患者在等待供體，按器官類型來分，等待腎臟移植的患者最多，達109530例，其次為肝臟15840例，心臟4088例，腎/胰2066例，肺1670例，胰1084例，腸242例，心臟/肺39例；而公布的器官移植數據顯示，2014年1-12月份開展的器官移植總數為29533例，其中來自死者的器官供體有23715例，來自活體的器官供體有5818例，而2014年1-12月份獲得的器官供體總數為14412例，其中來自死者的器官供體有8594例，來自活體的器官供體有5818例。歐洲器官移植網站（Eurotransplant）發表的2016年度報告（Annual Report 2016, http://www.eurotransplant.org/）顯示，在奧地利、比利時、克羅地亞、德國、匈牙利、盧森堡、荷蘭、斯洛文尼亞共和國共8個國家，總人口13370萬人中，2016年捐贈器官的死者有2001名，平均100萬人口中有14.96名死者捐贈了器官，而等待器官移植的患者則有14533名，其中移植了7568例，有1329名患者因等不到器官移植而死亡。我國目前每年可以實施臨床器官移植的數量約為1萬例，而等待器官移植的病人則有150萬，等待器官移植與可進行器官移植患者的數量比值為150:1。近年來，隨著我國糖尿病、慢性腎病、心血管疾病以及肝炎等疾病患者的大幅增長，使得發展成為終末期肝、腎、心等器官衰竭的病人正在或將急劇增加，對器官移植需求的壓力也將越來越大。而且，從2015年1月1日起，我國已經全面停止使用死囚器官作為移植供體來源，公民去世后自愿器官捐獻將成為我國器官移植使用的最終來源，這勢必導致器官供體本已日益短缺的形勢更加嚴峻。器官移植獲取組織（OPO）對我國現有的173家器官移植醫院的統計，截至2016年12月31日，全國累計實現逝世后器官捐獻9996例，捐獻大器官26613個，其中2016年實現捐獻4080例，每百萬人口捐獻率為2.98，按平均每例可捐獻3個器官算，約有1.2萬個逝后捐獻器官可供移植，但過去一年加上親體移植，全國也僅開展1.3萬例移植手術，且其中大量是肝移植和腎移植，心肺移植較少；捐獻器官11296個，比2015年度增加47.5%；各種渠道報名登記器官捐獻志愿人數104538人，比2015年度增加三倍多。盡管器官捐獻得到飛速發展，但對于全國等待供體的龐大患者群體來說，死者捐獻的器官只是杯水車薪。因此，器官的嚴重短缺，最終將給病人、家庭、社會和國家帶來沉重負擔，已成為全球性的社會問題。尋找新的供體來源來解決目前器官短缺的難題刻不容緩。目前，異種器官移植被公認為解決全球人類器官供體嚴重不足的有效途徑，更有甚者認為是唯一途徑。