[發明專利]一種固定化脂肪酶及其制備方法在審
| 申請號： | 201810362084.1 | 申請日： | 2018-04-20 |
| 公開（公告）號： | CN108486094A | 公開（公告）日： | 2018-09-04 |
| 發明（設計）人： | 胡云峰;徐珊;李任強;張繼福;張云;孫愛君 | 申請（專利權）人： | 中國科學院南海海洋研究所 |
| 主分類號： | C12N11/08 | 分類號： | C12N11/08 |
| 代理公司： | 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001 | 代理人： | 劉明星 |
| 地址： | 510301 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 固定化脂肪酶 制備 磷酸鉀緩沖液 酶活 酶液 環氧樹脂 耐受性 脂肪酶 操作穩定性 儲存穩定性 溫度耐受性 澄清酶液 工業應用 固定化 抽濾 酶粉 回收率 洗滌 溶解 | ||
1.一種固定化脂肪酶的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
將脂肪酶溶于pH 5.5～8.5的緩沖液中，10000r/min離心得到脂肪酶酶液，按照環氧樹脂：脂肪酶酶液為0.5～7g：4mL的比例將環氧樹脂放入酶液中，在18～28℃條件下固定化12～24h；然后洗滌、抽濾、干燥。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的環氧樹脂為環氧樹脂LXEP-120、LX-1000EP、ES-1、ES-3、ES-5或ES-7。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的環氧樹脂為環氧樹脂LXEP-120。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的緩沖液為磷酸鉀緩沖液、磷酸鈉緩沖液、檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液、Tris-HCl緩沖液或甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液。
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述的緩沖液為濃度為1.0mol/L的pH6.0的磷酸鉀緩沖液。
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的酶液濃度為2mg/mL，環氧樹脂：脂肪酶酶液的比例為5g：4mL。
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的固定化溫度為22℃、固定化時間為12h。
8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
用1.0mol/L的pH為6.0的磷酸鉀緩沖液溶解脂肪酶酶粉制備濃度為2.0mg/mL的酶液，10000r/min離心12min后得到澄清酶液，按照5g：4mL的比例將型號為LXEP-120的環氧樹脂置于酶液中，在150rpm、22℃條件下固定化12h，然后用1.0mol/L的pH為6.0的磷酸鉀緩沖液溶洗滌3次，抽濾，于40℃干燥，得到固定化脂肪酶。
9.根據權利要求1-8任意一項所述的固定化脂肪酶的制備方法制備得到的固定化脂肪酶。
10.權利要求9所述的固定化脂肪酶在催化酯類的水解、醇解、酯化、轉酯化及酯類的逆向合成反應中的應用。
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