[發明專利]一種快速區分葡萄球菌的方法

在審

• 申請號: 201810360633.1
• 申請日: 2018-04-20
• 公開（公告）號: CN108715886A
• 公開（公告）日: 2018-10-30
• 發明（設計）人: 朱榮進;黃任;楊春
• 申請（專利權）人: 江蘇華創檢測技術服務有限公司
• 主分類號: C12Q1/14
• 分類號: C12Q1/14;C12P7/06;G01N30/02;C12R1/445;C12R1/44
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速區分葡萄球菌的方法，其特征在于：包括如下步驟：

步驟一、胰蛋白胨大豆肉湯培養基配制：

稱取胰蛋白胨17g，植物蛋白胨3g，氯化鈉5g，葡萄糖2.5g，磷酸氫二鉀2.5g，加入1000ml蒸餾水，分裝到500ml錐形瓶中，在120℃的滅菌鍋內濕熱滅菌20min即得；

步驟二、測定步驟：

a.金黃色葡萄球菌培養

將金黃色葡萄球菌接種到裝有225ml的胰蛋白胨大豆肉湯培養基的無菌錐形瓶中，震蕩均勻，在35℃，120r/min的恒溫搖床中培養18-24h；

b.葡萄球菌發酵產物處理

將培養完成的金黃色葡萄球菌在8000r/min的條件下離心10min，取得上清液，取2.5ml上清液加入2.5ml二硫化碳，靜置分層后取二硫化碳液體進行檢測。同樣以胰蛋白胨大豆肉湯培養基為空白，取2.5ml培養基加入2.5ml二硫化碳，靜置分層后取二硫化碳液體作為空白對照；

c.采用氣相色譜條件進行檢測

采用如下氣相色譜條件進行檢測：色譜柱：TG-WAXMS毛細管色譜柱：30m×0.25mm×0.25μm；溫度為：柱箱恒溫40℃保持1min，以每分鐘10℃的速率升溫至80℃；分流進樣5:1；隔墊吹掃3ml/min，進樣口220℃，檢測器230℃；載氣為高純氮，載氣流速1.2ml/min；進樣量(μl)：1.0；

d.結果判斷

若樣品中能夠檢測到乙醇，則說明該菌株為金黃色葡萄球菌。

2.根據權利要求1所述的快速區分葡萄球菌的方法，其特征在于：所述的快速區分葡萄球菌的方法的儀器如下：氣相色譜儀；超凈臺，恒溫培養箱，恒溫搖床。

3.根據權利要求1所述的快速區分葡萄球菌的方法，其特征在于：所述的快速區分葡萄球菌的方法的主要材料和試劑如下：胰蛋白胨、植物蛋白胨、氯化鈉、葡萄糖、磷酸氫二鉀、瓊脂、二硫化碳。