[發明專利]川陳皮素抗原及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201810351799.7
• 申請日: 2018-04-19
• 公開（公告）號: CN108484751B
• 公開（公告）日: 2020-06-23
• 發明（設計）人: 崔永亮;焦必寧;趙靜;趙其陽;張耀海;陳愛華;王成秋;何悅
• 申請（專利權）人: 西南大學
• 主分類號: C07K14/765
• 分類號: C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K1/107;G01N33/531;G01N33/53
• 代理公司: 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) 51241
• 代理人: 李鵬

本發明公開了一種川陳皮素抗原及其制備方法與應用，包括：將川陳皮素與同時含有氨基和羧基的化合物B進行反應得到化合物C；化合物C和N?羥基琥珀酰亞胺在二環己基碳二亞胺或1?乙基?(3?二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽存在的條件下進行偶聯反應得到化合物D；化合物D與載體蛋白經偶聯反應得川陳皮素抗原；川陳皮素抗原在制備用于檢測樣品中川陳皮素的酶聯免疫試劑盒、川陳皮素的發光免疫試劑盒或免疫親和色譜柱中的應用。本發明的優點在于：能夠方便、快捷地獲得川陳皮素抗原，合成步驟簡潔明了、合成成本低，效果好。川陳皮素抗原進行免疫得到的抗體的特異性好、最低檢測限值低。

技術領域

本發明涉及化合物制備與應用技術領域，特別涉及一種川陳皮素抗原及其制備方法與應用。

背景技術

川陳皮素通用名為Nobiletin；化學名為：柚皮素7-鼠李糖苷；商品名為：川皮苷、川皮亭、蜜橘黃素；CAS登記號:478-01-3；分子式為：C21H22O8；相對分子量為：402.13。其化學結構式如下：

川陳皮素(Nobiletin)具有抗氧化活性而且可以抑制腫瘤細胞的生長，其中川陳皮素對Hela細胞、THP-1細胞、Colon26細胞、S180細胞、人乳腺癌細胞MDA-MB-231具有較好的抑制作用。關于川陳皮素抗癌作用的機制研究逐漸深入,研究發現川陳皮素直接抑制MEK活性,從而抑制ERK磷酸化,抑制MMP表達,達到抗癌作用。此外，川陳皮素還有拮抗哮喘炎癥，抗肝炎C型病毒，預防心臟病發作、糖尿病、中風和抵御肥胖癥等作用。它在骨代謝中也具有調節作用:可以抑制破骨細胞分化及前列腺素E₂(PGE₂)的生成。

目前，川陳皮素提取方法主要有超聲提取法、索氏提取法、響應面法優化超聲提取、固相分散萃取法、高速逆流色譜法等。川陳皮素含量分析方法有高效液相色譜法(HPLC)、超高效液相色譜(UPLC)、RP-HPLC法、HPLC-ESI-MS/MS法、HPLC-DAD，其靈敏度高，準確性好，但是這幾種檢測方法需要使用昂貴的儀器設備，檢測費用高，耗時長，不適用于現場快速檢測。與儀器分析法相比，免疫分析法具有快速、簡便、實時、易于進行現場檢測、樣品前處理簡單、靈敏度高、選擇性強、適合于高通量分析等優點，而且還能大幅度降低檢測成本。

發明內容

本發明針對現有技術的缺陷，提供了一種川陳皮素抗原及其制備方法與應用，能有效的解決上述現有技術存在的問題。

為了實現以上發明目的，本發明采取的技術方案如下：

一種川陳皮素抗原，其結構通式如式A所示，

式A結構式

所述式A中，X為O、S、CH₂、NH基團中的一種，n為0-6的整數；Protein表示載體蛋白，所述載體蛋白選自牛血清蛋白、卵清蛋白和血藍蛋白中至少一種。

一種川陳皮素抗原的制備方法，包括如下步驟：

步驟1，將川陳皮素與式B所示同時含有氨基和羧基的化合物進行反應得到式C所示化合物；

H₂N-X-(CH₂)n-COOH

式B結構式

式C結構式

所述式B和式C中，X為O、S、CH₂、NH基團中的一種，n為0-6的整數。

步驟2，式C所示化合物和N-羥基琥珀酰亞胺在二環己基碳二亞胺或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽存在的條件下進行偶聯反應得到式D所示化合物；