[發明專利]川陳皮素抗原及其制備方法與應用有效
| 申請號： | 201810351799.7 | 申請日： | 2018-04-19 |
| 公開（公告）號： | CN108484751B | 公開（公告）日： | 2020-06-23 |
| 發明（設計）人： | 崔永亮;焦必寧;趙靜;趙其陽;張耀海;陳愛華;王成秋;何悅 | 申請（專利權）人： | 西南大學 |
| 主分類號： | C07K14/765 | 分類號： | C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K1/107;G01N33/531;G01N33/53 |
| 代理公司： | 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) 51241 | 代理人： | 李鵬 |
| 地址： | 400715*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 陳皮 抗原 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種川陳皮素抗原，其特征在于：結構通式如式A所示，
所述式A中，X為O、S、CH2、NH基團中的一種，n為0-6的整數；Protein表示載體蛋白，所述載體蛋白選自牛血清蛋白、卵清蛋白和血藍蛋白中至少一種。
2.根據權利要求1所述的一種川陳皮素抗原的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟1，將川陳皮素與式B所示同時含有氨基和羧基的化合物進行反應得到式C所示化合物；
H2N-X-(CH2)n-COOH
式B結構式
所述式B和式C中，X為O、S、CH2、NH基團中的一種，n為0-6的整數；
步驟2，式C所示化合物和N-羥基琥珀酰亞胺在二環己基碳二亞胺或1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽存在的條件下進行偶聯反應得到式D所示化合物；
所述式D中，X為O、S、CH2、NH基團中的一種，n為0-6的整數；
步驟3，式D所示化合物與載體蛋白經偶聯反應即得式A所示川陳皮素抗原；所述載體蛋白選自牛血清蛋白、卵清蛋白和血藍蛋白中至少一種。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟1中，式B所示化合物選自羧甲氧基胺、肼基乙酸、氨基乙酸、氨基丙酸、氨基丁酸、氨基戊酸和氨基己酸中至少一種。
4.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟1中，式B化合物和川陳皮素的投料摩爾配比為(0.1-10)：1
反應的溫度為0～100℃，時間為6～48小時；
反應的溶劑選自吡啶、N,N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜和四氫呋喃中至少一種。
5.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟2中，式C所示化合物、N-羥基琥珀酰亞胺與二環己基碳二亞胺的摩爾份數比為1：(1～5)：(1～5)；
式C所示化合物、N-羥基琥珀酰亞胺與1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽的摩爾份數比為1：(1～5)：(1～5)；
所述偶聯反應的溫度為0～50℃，時間為4～24小時。
6.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟3中，式D所示化合物與所述載體蛋白的摩爾份數比為(5～30)：1；
所述偶聯反應的溫度為0～50℃，時間為8～36小時；所述偶聯反應在pH值為5～9的條件下進行；
式D所示化合物在所述載體蛋白的溶液中進行偶聯反應，所述載體蛋白的溶液是由所述載體蛋白加入至緩沖溶液中得到的，所述緩沖溶液選自碳酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液和4-羥乙基哌嗪乙磺酸緩沖液中至少一種，所述緩沖液的pH值均為7.4。
7.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：步驟3之后，所述方法還包括將所述偶聯反應的反應體系進行透析的步驟；所述透析步驟中，所用透析液為pH值為4～10、濃度為0.01～0.2mol/L的磷酸鹽緩沖溶液。
8.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述川陳皮素抗原是川陳皮素與載體蛋白通過酰胺鍵連接形成的偶聯物；所述酰胺鍵是式C上的羧基通過活潑酯與載體蛋白上的氨基形成的。
9.根據權利要求1所述的川陳皮素抗原或者權利要求2-8中所述的川陳皮素抗原的應用方法，其特征在于，包括：在制備用于檢測樣品中川陳皮素的酶聯免疫試劑盒、川陳皮素的發光免疫試劑盒或免疫親和色譜柱中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用方法，其特征在于：所述檢測樣品為水體、藥品、食品或土壤。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于西南大學，未經西南大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201810351799.7/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
