[發明專利]利用全景細胞多維系統檢測水體鎘離子的方法及其應用

在審

• 申請號: 201810351106.4
• 申請日: 2018-04-18
• 公開（公告）號: CN110389115A
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發明（設計）人: 楊琳;韓玉潔;王蘇桐
• 申請（專利權）人: 天津師范大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 天津創智天誠知識產權代理事務所(普通合伙) 12214
• 代理人: 李蕊;田陽

本發明公開了一種利用全景細胞多維系統檢測水體鎘離子的方法及其應用，利用全景細胞多維系統檢測水體鎘離子的方法按照下述步驟進行：將Cd²⁺加入到Datko培養基上，得到含鎘Datko培養基；將浮萍培養于得到的含鎘Datko培養基上，培養24小時，得到浮萍植株；夾取浮萍植株，用A液清洗后，將所述浮萍植株放入離心管中，加入組織固定液固定所述浮萍植株15～20min；利用全景細胞多維系統分析檢測，通過熒光對鎘離子進行定位分析，根據熒光強度分析鎘離子含量。本發明首創利用全景細胞多維系統檢測水體中的鎘離子，可在短時間內檢測水體中有無鎘離子，應用于水體鎘污染檢測，彌補了傳統的鎘離子測定方法的缺點。

技術領域

本發明屬于鎘離子檢測技術領域，具體來說涉及一種利用全景細胞多維系統檢測水體鎘離子的方法及其應用。

背景技術

鎘離子污染嚴重威脅人類健康，是致癌物之一，能引起肺、前列腺和睪丸的惡性腫瘤。近年來，痕量鎘的分析技術在不斷發展。傳統的鎘離子檢測方法主要有原子吸收光譜法、紫外分光光度法、電感耦合等離子體質譜法和電感耦合等離子體原子發射光譜分析等方法。這些方法存在價格昂貴，干擾因素多等缺點。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種利用全景細胞多維系統檢測水體鎘離子的方法及其應用，該方法利用水生植物浮萍吸收鎘離子，Leadamium^TM Green AM染料可追蹤鎘離子定位。

本發明的目的是通過下述技術方案予以實現的。

一種利用全景細胞多維系統檢測水體鎘離子的方法，按照下述步驟進行：

步驟1，調整Datko培養基的PH至5.6～5.8，于100～105kPa、120～125℃下進行滅菌；所述Datko培養基如下：

在所述步驟1中，滅菌時間為20～25分鐘。

步驟2，將Cd²⁺加入到步驟1得到的Datko培養基上，得到含鎘Datko培養基；

步驟3，采集浮萍，將浮萍培養于步驟2得到的含鎘Datko培養基上，培養24小時，得到浮萍植株；其中，培養條件為：溫度18～25℃，光周期16～18小時/天，光強95～97μmol m^-2s^-1；

步驟4，夾取步驟3得到的浮萍植株，用A液清洗后，將所述浮萍植株放入離心管中，加入組織固定液固定所述浮萍植株15～20min；其中，所述組織固定液如下：

乙醇水溶液 85～95g/l

冰醋酸 95～100g/l

去離子水 溶劑，

其中，在所述乙醇水溶液中，乙醇的體積濃度為80～90％；

所述A液如下：

在所述步驟3中，所述A液的PH為7～8。

步驟5，在酶解溫度為23～27℃的條件下，用組織酶解液在黑暗條件下酶解步驟4所得的浮萍植株25～30min，每間隔10～15min吹打混勻一次，得到懸浮的浮萍原生質體；所述組織酶解液如下：

步驟6，通過離心對步驟5所得的浮萍原生質體清洗2～5次，每次清洗的過程為：用20～25℃的B液垂直打入浮萍原生質體所在離心管，以使浮萍原生質體懸浮，懸浮后進行離心，離心后移除上層清液；

所述B液如下：