[發明專利]一種快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法及其裝置有效
| 申請號: | 201810346534.8 | 申請日: | 2018-04-17 |
| 公開(公告)號: | CN108469420B | 公開(公告)日: | 2019-02-05 |
| 發明(設計)人: | 嚴杰;喬杰;李蓉;劉平;鄭曉英;黃錦;莊新杰;李軍生;林勝利;袁一峰 | 申請(專利權)人: | 北京大學第三醫院 |
| 主分類號: | G01N21/31 | 分類號: | G01N21/31 |
| 代理公司: | 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 王闖 |
| 地址: | 100000 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 冷凍 生殖 玻璃化液 快速鑒定 冷凍處理 流動狀態 常規檢測 待測溶液 實施檢測 透明的 耗時 觀察 失敗 流動 表現 | ||
1.一種快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,所述方法包括以下步驟:取待測溶液置于-70~-90℃下冷凍處理5~10s,觀察經冷凍處理后所述溶液呈現的外觀和流動狀態,判斷所述溶液是否為生殖冷凍用玻璃化液;
如果所述溶液經冷凍后表現為透明的流動狀態,則所述溶液屬于生殖冷凍用玻璃化液;如果所述溶液經冷凍后表現為白色且不流動,則所述溶液不屬于生殖冷凍用玻璃化液。
2.一種快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,所述方法包括以下步驟:
A. 取待測溶液置于-70~-90℃冷凍處理5~10s,觀察經冷凍處理后所述溶液呈現的外觀和流動狀態;
B. 檢測所述待測溶液的OD值,將所測OD值與標準值進行比較,其中,所述標準值為標準生殖冷凍用玻璃化液的OD值;
C. 判斷所述溶液是否為生殖冷凍用玻璃化液:如果所述待測溶液在步驟A中經冷凍處理后呈現透明的流動狀態,且在步驟B中所述待測溶液的OD值在0.8~1.2倍標準值的范圍內,則所述待測溶液屬于生殖冷凍用玻璃化液,否則,所述待測溶液不屬于生殖冷凍用玻璃化液。
3.根據權利要求1或2所述的快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,所述待測溶液為疑似配制錯誤的生殖冷凍用玻璃化液,或者所述待測溶液為標簽疑似發生混淆的生殖冷凍用玻璃化液。
4.根據權利要求1或2所述的快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,用于冷凍處理的所述溶液的體積為10~200μl。
5.根據權利要求4所述的快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,用于冷凍處理的所述溶液的體積為10μl、15μl、20μl、30μl、40μl、50μl、60μl、70μl、80μl、90μl、100μl、110μl、120μl、130μl、140μl、150μl、160μl、170μl、180μl、190μl或200μl。
6.根據權利要求1或2所述的快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,所述冷凍處理的時間為5s、5.5s、6s、6.5s、7s、7.5s、8s、8.5s、9s、9.5s或10s。
7.根據權利要求1或2所述的快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,所述冷凍處理的溫度為-70℃、-75℃、-80℃、-85℃或-90℃。
8.根據權利要求1或2所述的快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,所述冷凍處理包括:在培養皿上滴加10~30μl待測溶液,置于-80℃下冷凍處理7s。
9.根據權利要求2所述的快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,所述待測溶液的OD值通過紫外分光光度計或酶標儀檢測獲得。
10.根據權利要求2所述的快速鑒定生殖冷凍用玻璃化液的方法,其特征在于,所述標準值已經預先測定好或者通過現場檢測標準生殖冷凍用玻璃化液的OD值的方式獲得標準值。
11.一種用于權利要求1~10任一項所述方法的裝置,其特征在于,所述裝置包括檢測板(1);
所述檢測板上設置有多個檢測杯(11);所述檢測杯(11)包括用于盛裝液體的杯主體(111)、沿杯主體頂部向上延伸的延長邊(112),所述延長邊與水平面成30~60°夾角,所述杯主體的容量為50~200μl;
所述延長邊(112)被分為上、下兩部分,其中下部為觀察區域(1121),上部為防濺區域(1122),其中,所述防濺區域(1122)涂覆有疏水性物質;
所述裝置還包括支撐架(2),所述支撐架(2)包括斜面(21)和位于所述斜面(21)前端的擋板(22),所述擋板(22)與所述斜面(21)基本上垂直;
所述檢測板(1)和檢測杯(11)中的至少一種使用耐低溫材質制備而成。
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