[發明專利]一種人類精液超快速冷凍保存體系

在審

• 申請號: 201810346285.2
• 申請日: 2018-04-18
• 公開（公告）號: CN108651440A
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發明（設計）人: 范立青;周戴;王行明;曾亞榮;孛昊
• 申請（專利權）人: 中南大學
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種人類精液超快速冷凍保存體系，包括冷凍保護劑、冷凍方法和解凍方法，其特征在于，采用本發明提供的冷凍保護劑，按照本發明所示的冷凍方法和解凍方法凍存和解凍人類精液，可以在解凍復蘇后獲得較好的冷凍復蘇率、精子活力和前向運動精子總數。

2.依照權利要求1所述的保護劑，其特征在于保護劑的成分包括糖類、人血清白蛋白、甘氨酸和雙蒸水。

3.依照權利要求2所述的糖類成分，其特征在于，該糖類成分可以是葡萄糖，蔗糖和海藻糖的其中之一。其質量配比關系為：若采用葡萄糖，則葡萄糖含量為0.045g/ml-0.108g/ml；若采用蔗糖，則蔗糖含量為0.086g/ml-0.205g/ml；若采用海藻糖，則海藻糖含量為0.095g/ml-0.227g/ml。

4.依照權利要求2所述的人血清白蛋白成分，其特征在于，人血清白蛋白的含量為每1毫升冷凍保護劑含有0.1％-0.5％的人血清白蛋白。

5.依照權利要求2所述的甘氨酸成分，其特征在于，甘氨酸的含量為每1毫升冷凍保護劑含有0.006克-0.025克。

6.依照權利要求1所述的冷凍方法，其特征在于，具體操作步驟如下：

(1)將優選后或者未處理人類精液，或經過睪丸穿刺或者附睪穿刺獲得到的微量精液，與冷凍保護劑按體積比1:1的比例混合均勻；

(2)將精液和冷凍保護劑混合物精液和冷凍保護劑混合物滴落點距離清潔液氮的液面至少5厘米；

(3)以每滴10微升-100微升的體積，將混合物滴入清潔液氮中；

(4)收集處于清潔液氮內的凝固液滴，可裝入普通凍存管中放置于液氮中凍存。

7.依照權利要求1所述的解凍方法，其特征在于，具體操作步驟如下：

(1)35℃-42℃預熱普通的精液培養基作為解凍液，解凍液的體積應至少是冷凍精液體積的10倍；

(2)將凍存的凝固精液液滴倒入預熱后的解凍液中至完全解凍；

(3)將解凍液和凍存精液混合物離心去上清，離心力保持在300g-500g之間，離心時間為3分鐘-5分鐘，沉淀后的精子可以直接應用于實踐。