[發明專利]神經生長因子的單克隆抗體及其編碼基因和應用

在審

• 申請號: 201810344670.3
• 申請日: 2018-04-17
• 公開（公告）號: CN108623687A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發明（設計）人: 王忠民;李百勇;夏瑜;張鵬
• 申請（專利權）人: 中山康方生物醫藥有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;A61K39/395;A61P25/00;A61P29/00;G01N33/68
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 郝文婷;劉明星

本發明公開了神經生長因子的單克隆抗體及其編碼基因和應用。本發明神經生長因子的單克隆抗體包括重鏈和輕鏈，重鏈包括重鏈恒定區和重鏈可變區，輕鏈包括輕鏈恒定區和輕鏈可變區，重鏈可變區包含三個互補決定區HCDR1、HCDR2和HCDR3；輕鏈可變區包含三個互補決定區LCDR1、LCDR2和LCDR3。本發明神經生長因子的單克隆抗體能特異性地與神經生長因子結合，可用于檢測神經生長因子的存在和/或水平，以及制備抑制TF?1細胞的神經生長因子依賴性增殖的藥物、制備治療或預防神經性疼痛、慢性疼痛、炎性疼痛中的至少一種的藥物，具有良好的應用前景和市場價值。

技術領域

本發明屬免疫學和分子生物學技術領域，更具體地說，本發明涉及一種神經生長因子的單克隆抗體及其編碼基因和在制備檢測試劑盒、多種藥物中的應用。

背景技術

神經生長因子(nervous growth factor,NGF)是最早確定的神經生長營養因子之一，在生物體神經元的發生、分化及功能維持中承擔重要作用。NGF可高親和性與原肌球蛋白受體激酶(tropomyosin receptor kinaseA,TrKA)結合，并且能夠與P75^NTR受體非特異性結合。隨著越來越多的證據表明，除具有促進神經元的生長、發育、存活等生物學作用外，NGF被廣泛認為是持續性疼痛和慢性疼痛的介導者。例如，靜脈輸入NGF可導致全身性疼痛反應，局部注射NGF可在注射部位引起痛覺過敏及異常疼痛。NGF在炎癥部位的分泌量增加，并且維持時間較長。此外，在某些性質的癌癥中，過量的NGF促進神經纖維的生長和浸潤，從而誘發癌痛。有報道稱TrKA受體的基因敲除小鼠缺乏痛覺，認為NGF是與疼痛的表現緊密相關的分子。證據表明，在神經性和慢性炎癥性疼痛動物模型中，使用NGF抑制劑可以緩解疼痛反應。在鼠類癌痛模型中和型抗NGF抗體可使疼痛顯著減輕。

抗體治療藥物，特別是單克隆抗體已在多種疾病的治療中取得了良好的療效。制備安全、有效地抗NGF單克隆抗體可為慢性痛、癌痛的治療提供一類不同于阿片類、非甾體類等具有成癮性或消化道副作用的新的鎮痛藥物。目前由輝瑞制藥有限公司研發的Tanezumab在臨床前及臨床研究中展現出了良好的鎮痛效果，但是目前尚缺乏其它活性更高、排除種屬差異性、全人化源化抗NGF抗體。

發明內容

本發明的目的在于：克服現有技術中存在的神經生長因子抗體活性不高且具有種屬差異性的缺陷，提供一種活性高、排除種屬差異性的全人源化神經生長因子的單克隆抗體及其編碼基因和應用，以及其在制備檢測試劑盒、多種藥物中的應用。

為了實現上述發明目的，本發明提供了一種可與人神經生長因子特異性良好結合的全人源化單克隆抗體；包括重鏈和輕鏈，重鏈包括重鏈恒定區和重鏈可變區，輕鏈包括輕鏈恒定區和輕鏈可變區。

輕鏈和重鏈的可變區決定抗原的結合；每條鏈的可變區均含有三個高變區，稱互補決定區(CDR)(重鏈(H)的CDR包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，輕鏈(L)的CDR包含LCDR1、LCDR2、LCDR3；其由Kabat等人命名，見Sequences of Proteins of Immunological Interest,Fifth Edition(1991),第1-3卷,NIH Publication 91-3242,Bethesda Md)。

本發明中，所述重鏈可變區包含三個互補決定區HCDR1、HCDR2和HCDR3，輕鏈可變區包含三個互補決定區LCDR1、LCDR2和LCDR3；

其中，所述互補決定區HCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示；

所述互補決定區HCDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；

所述互補決定區HCDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示；

所述互補決定區LCDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO:8所示；