[發明專利]一種延長保存期的口蹄疫病毒cELISA抗體檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201810342072.2
• 申請日: 2018-04-17
• 公開（公告）號: CN110161237A
• 公開（公告）日: 2019-08-23
• 發明（設計）人: 苗海生;李樂;李華春;廖德芳;寇美玲
• 申請（專利權）人: 云南省畜牧獸醫科學院
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/535
• 代理公司: 深圳龍圖騰專利代理有限公司 44541
• 代理人: 蔡瑞

1.一種延長保存期的口蹄疫病毒cELISA抗體檢測試劑盒，其特征在于，通過如下步驟制備而成：

1)制備抗原保護劑：配制0.01M的PBS緩沖液作母液，依次加入10％BSA、10％的海藻糖、3％枸杞多糖、3％蘆薈多糖、0.01％硫柳汞、0.05％吐溫-20；充分混勻后經0.45nm孔徑濾膜過濾除菌，經無菌檢驗合格后方可使用；

2)制備口蹄疫病毒抗原固定板：將兔抗口蹄疫病毒抗體用pH9.6的包被液稀釋，50μl/孔加入到96孔酶標板內，4℃靜置16小時；倒掉包被液，用0.01M的PBST洗滌3遍；每孔加入口蹄疫病毒抗原懸液50μl，37℃反應1小時；倒掉液體，用0.01M PBST洗滌3遍，即為口蹄疫病毒抗原固定板；

3)制備延長保存期的口蹄疫病毒cELISA抗體檢測酶標板：向步驟2)所得口蹄疫病毒抗原固定板中加入步驟1)所得抗原保護劑，每孔加入50μL抗原保護劑，4℃平穩放置16小時，倒棄抗原保護劑，用吸水紙上輕輕拍干，放置于通風柜或其它風干設備室溫風干1小時，即可獲得延長保存期的口蹄疫病毒cELISA抗體檢測酶標板；

4)制備試劑盒后保存：用步驟3)所得檢測酶標板5塊，與相應的豚鼠抗口蹄疫病毒血清600μL、口蹄疫病毒陽性對照血清300μL、口蹄疫病毒陰性對照血清600μL、兔抗豚鼠HRP標記二抗50μL、稀釋液60mL、TMB顯色液30mL、終止液30mL、0.01M的PBS粉劑2袋和2mL的吐溫-20，共同組成延長保存期的口蹄疫病毒cELISA抗體檢測試劑盒，置于4℃保存。

2.根據權利要求1所述延長保存期的口蹄疫病毒cELISA抗體檢測試劑盒，其特征在于，所述包被液為0.1M的碳酸鹽緩沖液。

3.根據權利要求1所述延長保存期的口蹄疫病毒cELISA抗體檢測試劑盒，其特征在于，所述抗原保護劑的組分純度要求為：BSA≥98％，海藻糖≥98％，枸杞多糖≥70％，蘆薈多糖≥70％，硫柳汞≥98％，吐溫-20≥99％。