[發明專利]一種采用皺褶假絲酵母脂肪酶催化立體選擇性拆分2-(4-甲基苯基)丙酸對映體的方法

在審

• 申請號: 201810337649.0
• 申請日: 2018-04-16
• 公開（公告）號: CN108531539A
• 公開（公告）日: 2018-09-14
• 發明（設計）人: 唐課文;張盼良;劉光勇;許衛鳳
• 申請（專利權）人: 湖南理工學院
• 主分類號: C12P41/00
• 分類號: C12P41/00;C12P7/40
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• 代理人: 暫無信息

本發明介紹了獲得2?(4?甲基苯基)丙酸單一對映體的一種新的手性拆分方法，即酶催化立體選擇性水解2?(4?甲基苯基)丙酸酯對映體合成2?(4?甲基苯基)丙酸單一對映體的方法。利用皺褶假絲酵母脂肪酶高選擇性、高催化效率水解2?(4?甲基苯基)丙酸酯映體，以獲得高光學純度的(+)?2?(4?甲基苯基)丙酸；利用環糊精對2?(4?甲基苯基)丙酸酯對映體的包結作用，提高2?(4?甲基苯基)丙酸酯的轉化率；底物轉化率和產物光學純度分別可高達40.76%和96.24%，立體選擇性E高達145；該方法克服了一般拆分技術所存在的光學純度低、產率低、污染環境等問題，且該方法可實現2?(4?甲基苯基)丙酸酯對映體水解的高轉化率和高選擇性，從而實現了拆分手性化合物的無毒無害、環保而且反應條件溫和，設備簡單，操作簡便，成本低等目的。

技術領域

本發明屬于生物法制備手性化合物，涉及一種應用皺褶假絲酵母脂肪酶立體選擇性催化水解2-(4-甲基苯基)丙酸酯對映體合成單一構型的2-(4-甲基苯基)丙酸對映體的方法。將皺褶假絲酵母脂肪酶用于水解外消旋2-(4-甲基苯基)丙酸酯合成單一構型的(+)-2-(4-甲基苯基)丙酸。

背景技術

2-(4-甲基苯基)丙酸是一種親水性的合成非甾體高效抗炎藥物中間體，由于其是合成洛索洛芬鈉的藥物前體。洛索洛芬鈉一種非甾體消炎藥抗炎效果好，副作用小。與其他非甾體抗炎藥(NSAID)相比，作用明顯且對胃腸道、腎臟毒害作用小。文獻報道，對于非甾體高效抗炎藥一般是(S)型對映體具有抗炎活性，而(R)型對映體無藥效或有毒副作用；因此為了獲得單一藥物對映體必須首先獲得單一藥物中間體；為了減少給藥量和對人體產生的毒副作用，開發單一對映體的制備方法具有重要意義。

單一手性藥物對映體的獲得方法主要有化學合成法和外消旋體拆分法。化學合成法易產生大量無效甚至對環境有害的對映體造成環境污染。到目前為止，工業應用中占主導地位的手性制備工藝仍然是外消旋體拆分法。它的工藝簡單、易于工業化生產、成本較低、開發時間較短。常見的外消旋拆分技術包括結晶法、色譜法、膜法、酶或微生物法、萃取法等。其中手性溶劑萃取法因為容易實現連續生產、容易工業放大、操作簡單、生產成本低、適用范圍廣等，正受到越來越多的關注，被認為是最具發展潛力和應用前景的手性拆分技術之一。目前困擾手性溶劑萃取法大規模工業應用的關鍵問題是手性萃取劑選擇性不夠高、產率低。而酶法拆分能夠利用酶的高度立體、位點、區域選擇性，催化化學合成的外消旋體或衍生物中的某一對映體進行水解以獲得高產率、高選擇性的單一對映體，具有選擇性高、反應條件溫和、反應較穩定及易于工業化的特點。同時，酶法拆分可以解決化學合成易造成環境污染，產生大量無效甚至對環境有害的對映體問題，對于保護人類的自然環境和健康具有極為重要的意義。

本發明中公開了一種利用皺褶假絲酵母脂肪酶立體選擇性催化水解2-(4-甲基苯基)丙酸酯對映體合成單一構型的(+)-2-(4-甲基苯基)丙酸的方法，本發明利用皺褶假絲酵母脂肪酶對2-(4-甲基苯基)丙酸酯對映體的高選擇性、高催化效率，利用綠色添加劑環糊精提高2-(4-甲基苯基)丙酸酯對映體的溶解度，獲得底物轉化率高、產物光學純度高的(+)-2-(4-甲基苯基)丙酸。該技術解決了一般拆分技術所存在的低光學純度和產率低的問題，同時該方法反應條件溫和、綠色環保、操作簡便。

發明內容

本發明的目的是提供一種獲得單一構型(+)-2-(4-甲基苯基)丙酸對映體的高效技術。

本發明針對于一般外消旋體拆分法分離手性對映體的產物光學純度及其產率不高等難題，提出了一種獲得單一構型(+)-2-(4-甲基苯基)丙酸的方法—利用皺褶假絲酵母脂肪酶對2-(4-甲基苯基)丙酸酯對映體的高選擇性、高催化效率合成單一對映體(+)-2-(4-甲基苯基)丙酸的方法。