[發(fā)明專利]一種高效NK細(xì)胞培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810331464.9
• 申請日: 2018-04-13
• 公開（公告）號: CN108504636A
• 公開（公告）日: 2018-09-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王曉冰
• 申請（專利權(quán)）人: 上海錦映生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;C12N5/078;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種高效NK細(xì)胞培養(yǎng)方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：稀釋單克隆抗體CD16和CD2獲得抗體稀釋液，然后用抗體稀釋液過夜包被細(xì)胞培養(yǎng)容器；

步驟2：分離單個(gè)核細(xì)胞；

步驟3：將步驟2獲得的單個(gè)核細(xì)胞接種到培養(yǎng)容器中，從接種時(shí)間開始計(jì)時(shí)，每隔3天更換新鮮的細(xì)胞培養(yǎng)基，培養(yǎng)18天后收集細(xì)胞；所述的細(xì)胞培養(yǎng)基中含有乙酰化α葡聚糖。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效NK細(xì)胞培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的乙酰化α葡聚糖濃度為5-15mg/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效NK細(xì)胞培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的細(xì)胞培養(yǎng)基，還含有10％knockout血清替代品和500U/ml的IL-2。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效NK細(xì)胞培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的細(xì)胞培養(yǎng)基為CellGro SCGM或RPMI-1640培養(yǎng)基。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效NK細(xì)胞培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)容器為細(xì)胞培養(yǎng)瓶或細(xì)胞培養(yǎng)板。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效NK細(xì)胞培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)容器為T75細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高效NK細(xì)胞培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟3的接種細(xì)胞密度為2×10⁶/ml。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任意一項(xiàng)所述方法培養(yǎng)得到的NK細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的NK細(xì)胞在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。