[發(fā)明專利]用于奶牛乳房炎病原體快速分型檢測的探針組合在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810326054.5 | 申請日： | 2018-04-12 |
| 公開（公告）號： | CN108411013A | 公開（公告）日： | 2018-08-17 |
| 發(fā)明（設計）人： | 張菁華;黃超杰;唐愛發(fā);吳誠龍;王翰;楊剛;鐘遠堂 | 申請（專利權）人： | 深圳市第二人民醫(yī)院 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C40B40/06 |
| 代理公司： | 深圳鼎合誠知識產(chǎn)權代理有限公司 44281 | 代理人： | 向武橋;彭家恩 |
| 地址： | 518037 廣東省深*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 奶牛乳房炎 致病菌 寡核苷酸探針 檢測 分型檢測 探針組合 病原體 支原體 病原微生物 多重實時熒光PCR 分子流行病學 設計通用引物 致病性細菌 致病性真菌 疾病防治 數(shù)據(jù)支撐 早期篩查 細菌性 真菌性 致病性 分型 探針 研究 | ||
1.一種用于奶牛乳房炎病原體快速分型檢測的探針組合，其特征在于，包括：
用于檢測致病性細菌的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:3所示；
用于檢測致病性真菌的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:6所示；
用于檢測致病性支原體的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:9所示。
2.一種用于奶牛乳房炎病原體快速分型檢測的引物探針組合，其特征在于，包括：
用于檢測致病性細菌的正向引物的序列如SEQ ID NO:1所示、反向引物的序列如SEQID NO:2所示、寡核苷酸探針的序列如SEQ ID NO:3所示；
用于檢測致病性真菌的正向引物的序列如SEQ ID NO:4所示、反向引物的序列如SEQID NO:5所示、寡核苷酸探針的序列如SEQ ID NO:6所示；
用于檢測致病性支原體的正向引物的序列如SEQ ID NO:7所示、反向引物的序列如SEQID NO:8所示、寡核苷酸探針的序列如SEQ ID NO:9所示。
3.如權利要求2所述的引物探針組合，其特征在于，還包括：
用作內(nèi)標的奶牛特異性正向引物的序列如SEQ ID NO:10所示、反向引物的序列如SEQID NO:11所示、熒光探針的序列如SEQ ID NO:12所示。
4.一種用于奶牛乳房炎病原體快速分型檢測的試劑盒，其特征在于，包括：
用于檢測致病性細菌的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:3所示；
用于檢測致病性真菌的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:6所示；
用于檢測致病性支原體的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:9所示。
5.如權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，還包括：
用作內(nèi)標的奶牛特異性寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:12所示。
6.一種用于奶牛乳房炎病原體快速分型檢測的試劑盒，其特征在于，包括Q-PCR反應液、酶混合液、陽性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品，所述Q-PCR反應液含有權利要求4或5所述的寡核苷酸探針。
7.如權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述酶混合液為熱啟動TaqDNA聚合酶和UDG酶混合液。
8.如權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述陽性質(zhì)控品為含有分別插入細菌16srRNA特異性擴增區(qū)域、真菌ITS特異性擴增區(qū)域、支原體屬16srRNA特異性擴增區(qū)域、奶牛12s rRNA特異性擴增區(qū)域的pUC57載體質(zhì)粒混合物，其中，細菌16s rRNA通用保守區(qū)域序列如SEQ ID NO：13所示，真菌ITSrRNA通用保守區(qū)域序列如SEQ ID NO：14所示，支原體屬16srRNA通用保守區(qū)域序列如SEQ ID NO：15所示，奶牛12s rRNA特異性保守區(qū)域序列如SEQIDNO：16所示。
9.如權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述陰性質(zhì)控品為無菌TE緩沖液。
10.一種用于奶牛乳房炎病原體快速分型檢測的基因芯片，其特征在于，包括芯片載體及設于所述芯片載體的探針組合，所述探針組合包括：
用于檢測致病性細菌的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:3所示；
用于檢測致病性真菌的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:6所示；
用于檢測致病性支原體的寡核苷酸探針，其序列如SEQ ID NO:9所示。
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