[發(fā)明專利]一種用于快速檢測紫杉醇的試紙及其制備方法、試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810325433.2
• 申請日: 2018-04-12
• 公開（公告）號: CN108732344B
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王慧英
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇維爾生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/577;G01N33/533;G01N33/50
• 代理公司: 常州智慧騰達專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32328
• 代理人: 曹軍

本發(fā)明涉及一種用于快速檢測紫杉醇的試紙及其制備方法、試劑盒，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明用于快速檢測紫杉醇的試紙，包括樣品墊、熒光微球標記物墊、NC膜、吸水紙、底板；所述樣品墊、熒光微球標記物墊、NC膜、吸水紙依次粘貼于底板上；所述熒光微球標記物墊上包被有熒光微球紫杉醇?BSA?生物素標記物、熒光微球兔IgG標記物；所述NC膜上分別包被有紫杉醇抗體、鏈霉親和素、羊抗兔IgG。采用本發(fā)明的試紙進行檢測，快速、靈敏，僅需時5?20分鐘即可定量測定，可廣泛應(yīng)用于POCT臨床治療藥物監(jiān)測(TDM)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用于快速檢測紫杉醇的試紙及其制備方法、試劑盒，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

紫杉醇(Taxol or Paclitaxol)是一種具有抗腫瘤活性的天然產(chǎn)物，作用機制獨特，抗瘤譜廣，近年來受到廣泛重視。用于治療乳腺癌，卵巢癌和非小細胞癌等，是最常用的細胞毒性劑之一，但其有效治療窗(有效濃度和毒性濃度之差)窄、個體差異大、毒副作用強，紫杉醇的血藥濃度和治療效果的之間的關(guān)系，因個體藥物代謝的差異而相距甚大。紫杉醇在血液中約90％與血清蛋白結(jié)合，而唾液水平與其血液的游離藥物濃度直接相關(guān)。通過監(jiān)測血液中特別是唾液中的紫杉醇水平和調(diào)節(jié)劑量，可以更好地控制和限制患者毒副作用的發(fā)生。快速有效地控制治療藥物毒性、改善治療效果，對治療藥物進行血藥濃度監(jiān)測及個體化劑量調(diào)整是十分必要且可行的。

治療藥物檢測(TDM)是在藥代動力學(xué)原理的指導(dǎo)下，應(yīng)用先進的技術(shù)平臺，快速測定血液中治療藥物濃度，有效地幫助臨床醫(yī)生給藥方案個體化，以提高藥物的療效，避免或減少毒副反應(yīng)，給患者提供最佳用藥方案，同時也為藥物過量中毒的診斷和處理提供有價值的實驗室依據(jù)。

POCT泛指近患者床旁進行的一種快速檢測分析技術(shù)，它能在床旁、病房或中心實驗室之外的其他地方開展，亦稱之為即時臨床檢測或床邊檢測。用于POCT的傳統(tǒng)定量免疫檢測產(chǎn)品(放免法、酶聯(lián)法)都需要將標記的抗原或抗體(探針)和游離(探針)的抗原或抗體進行分離，才能通過儀器讀取結(jié)果，所需時間長、操作步驟多、系統(tǒng)誤差大。

目前國內(nèi)市場中關(guān)于紫杉醇POCT檢測還處于空白期，因此，急需開發(fā)一種快速檢測人體唾液或血液中紫杉醇的試紙。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種用于快速檢測紫杉醇的試紙，用該試紙能夠?qū)崿F(xiàn)紫杉醇的臨床快速檢測。

本發(fā)明的第二個目的在于提供一種用于快速檢測紫杉醇的試紙的制備方法。

本發(fā)明的第三個目的在于提供一種用于快速檢測紫杉醇的試劑盒。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是：

一種用于快速檢測紫杉醇的試紙，包括樣品墊、熒光微球標記物墊、NC膜、吸水紙、底板；所述樣品墊、熒光微球標記物墊、NC膜、吸水紙依次粘貼于底板上；所述熒光微球標記物墊上包被有熒光微球紫杉醇-BSA-生物素標記物、熒光微球兔IgG標記物；所述NC膜上分別包被有紫杉醇抗體、鏈霉親和素、羊抗兔IgG。

本發(fā)明的用于快速檢測紫杉醇的試紙，利用熒光免疫層析技術(shù)，采用紫杉醇抗體檢測紫杉醇。當(dāng)待測樣本中不含紫杉醇或者紫杉醇濃度低于最低檢測限時，熒光微球紫杉醇-BSA-生物素標記物會與預(yù)包被的紫杉醇抗體結(jié)合(D區(qū))，T區(qū)無法形成可被熒光讀數(shù)儀檢測到的信號反應(yīng)線；當(dāng)待測樣本中含有的紫杉醇濃度等于或高于最低檢測限時，紫杉醇和熒光微球紫杉醇-BSA-生物素標記物，在層析作用下沿著硝酸纖維膜向前移動，小分子的紫杉醇在硝酸纖維膜上爬行較快，先行與紫杉醇抗體結(jié)合，抑制紫杉醇抗體和熒光微球紫杉醇-BSA-生物素標記物的結(jié)合，熒光微球紫杉醇-BSA-生物素標記物則被檢測區(qū)(T區(qū))預(yù)包被的鏈霉親和素Strepdavidin結(jié)合，最終在T區(qū)形成可被熒光讀數(shù)儀檢測到的信號反應(yīng)線；熒光信號的強弱與樣本中紫杉醇含量存在正相關(guān)，樣本中紫杉醇濃度越高，T線信號質(zhì)越強；質(zhì)控區(qū)(C)包被羊抗兔IgG多克隆抗體，無論樣本中是否存在紫杉醇，熒光微球兔IgG標記物均會與C區(qū)多抗反應(yīng)形成熒光反應(yīng)信號。