[發明專利]一種用于快速檢測紫杉醇的試紙及其制備方法、試劑盒

有效

• 申請號: 201810325433.2
• 申請日: 2018-04-12
• 公開（公告）號: CN108732344B
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 王慧英
• 申請（專利權）人: 江蘇維爾生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/577;G01N33/533;G01N33/50
• 代理公司: 常州智慧騰達專利代理事務所(普通合伙) 32328
• 代理人: 曹軍

1.一種用于快速檢測紫杉醇的試紙，其特征在于，包括樣品墊、熒光微球標記物墊、NC膜、吸水紙、底板；所述樣品墊、熒光微球標記物墊、NC膜、吸水紙依次粘貼于底板上；所述熒光微球標記物墊上包被有熒光微球紫杉醇-BSA-生物素標記物、熒光微球兔IgG標記物；所述NC膜上依次包被有紫杉醇抗體、鏈霉親和素、羊抗兔IgG。

2.根據權利要求1所述的用于快速檢測紫杉醇的試紙，其特征在于，所述熒光微球紫杉醇-BSA-生物素標記物由包括以下步驟的制備方法制得：將熒光微球溶液與2-嗎啉乙磺酸溶液混勻，之后加入N-羥基硫代琥珀酰亞胺，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽混勻后反應30min，之后離心10min，棄上清液后加入稀釋后的紫杉醇-BSA半抗原，超聲重懸，反應4小時，然后加入生物素-NHS溶液，反應2小時，再加入BSA溶液封閉，混勻，攪拌反應0.5h小時，離心15min，棄去上清液，用微球儲存液超聲重懸，4℃保存。

3.根據權利要求2所述的用于快速檢測紫杉醇的試紙，其特征在于，所述稀釋后的紫杉醇-BSA半抗原的濃度為0.7～1.0mg/ml。

4.根據權利要求2所述的用于快速檢測紫杉醇的試紙，其特征在于，所述紫杉醇-BSA半抗原由包括以下步驟的制備方法制得：

1)紫杉醇半琥珠酸酯的制備：將紫杉醇、丁二酸酐溶于吡啶溶液中，室溫反應過夜，將所得反應液滴加入冰水中，過濾收集沉淀，洗滌、干燥，即得；所述紫杉醇與丁二酸酐的質量比為20:38；

2)紫杉醇-BSA半抗原的制備：將步驟1)所得的紫杉醇半琥珠酸酯溶于DMF，然后加入2-嗎啉乙磺酸、N-羥基硫代琥珀酰亞胺，室溫反應2小時，得活化的紫杉醇，將活化的紫杉醇加入到BSA溶液中，4℃反應過夜，之后用PBS溶液透析即得；所述紫杉醇半琥珠酸酯、2-嗎啉乙磺酸、N-羥基硫代琥珀酰亞胺的質量比為10:10:5。

5.根據權利要求1所述的用于快速檢測紫杉醇的試紙，其特征在于，所述熒光微球兔IgG標記物由包括以下步驟的制備方法制得：將熒光微球溶液與2-嗎啉乙磺酸溶液混勻，之后加入N-羥基硫代琥珀酰亞胺，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽混勻后反應30min，之后離心10min，棄上清液后加入稀釋后的兔IgG，超聲重懸，反應4小時，然后加入BSA溶液封閉，混勻，攪拌反應0.5h小時，離心15min，棄去上清液，用微球儲存液超聲重懸，4℃保存。

6.一種如權利要求1所述的用于快速檢測紫杉醇的試紙的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)熒光標記物墊的制備：將熒光微球紫杉醇-BSA-生物素標記物用標記液稀釋至0.1-1.0mg/ml，再加入0.2mg/ml的熒光微球兔IgG標記物，混勻后噴在玻璃纖維上，干燥即得；

2)在NC膜上分別包被紫杉醇抗體、鏈霉親和素、羊抗兔IgG，干燥即得；

3)將樣品墊、熒光微球標記物墊、NC膜、吸水紙依次粘貼于底板上，2mm重疊，壓緊后3.8mm裁條，即得。

7.一種用于快速檢測紫杉醇的試劑盒，其特征在于，包括卡殼和權利要求1所述的用于快速檢測紫杉醇的試紙。