[發(fā)明專利]一種用于檢測腎癌中囊性腎細胞癌亞型的基因檢測試劑盒在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810323048.4 | 申請日： | 2018-04-11 |
| 公開（公告）號： | CN108410988A | 公開（公告）日： | 2018-08-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 蔣靈鋒 | 申請（專利權(quán)）人： | 蔣靈鋒 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 南京匯盛專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 趙超 |
| 地址： | 214023 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 囊性腎 細胞癌 亞型 甲基化 位點 基因檢測試劑盒 檢測 正常組織 腎癌 診斷 非甲基化 特異性強 細胞癌癌 準(zhǔn)確率 引物 樣本 基因 | ||
1.一種診斷腎癌中囊性腎細胞癌亞型的基因檢測試劑盒，其特征在于：含有用于檢測基因ENST00000547387在92bp～205bp位點完全甲基化的引物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因檢測試劑盒，其特征在于：所述引物的上游序列如Sequence NO.13所示，下游序列如Sequence NO.14所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因檢測試劑盒，其特征在于：還含PCR反應(yīng)所需酶和試劑。
4.一種診斷腎癌中囊性腎細胞癌亞型的方法，其特征在于，包括如下步驟：
步驟S1，取腎癌患者原發(fā)灶組織于液氮保存?zhèn)錂z；
步驟S2，檢測前取出原發(fā)灶組織，采用酚/氯仿抽提法提取組織中總DNA；
步驟S3，取2μg總DNA用2mol/LNaOH變性處理，于10mmol/L氫醌和3mol/L亞硫酸氫鈉中50℃反應(yīng)12～16h，處理后的DNA用WizardDNA純化試劑進行純化；
步驟S4，使用用于檢測基因ENST00000547387在92bp～205bp位點完全甲基化的引物對純化后的DNA進行PCR擴增，擴增產(chǎn)物經(jīng)2％瓊脂糖凝膠電泳，用UV凝膠電泳成像及圖像分析系統(tǒng)進行圖像分析，若擴增出目的條帶則判定為囊性腎細胞癌亞型。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于：所述引物的上游序列如Sequence NO.13所示，下游序列如Sequence NO.14所示。
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