[發明專利]一種仿生礦化固定化酶和輔因子的制備方法及仿生礦化固定化酶和輔因子

在審

• 申請號: 201810321796.9
• 申請日: 2018-04-11
• 公開（公告）號: CN108715844A
• 公開（公告）日: 2018-10-30
• 發明（設計）人: 高靜;姜艷軍;周麗亞;曹廣秀
• 申請（專利權）人: 河北工業大學
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14
• 代理公司: 石家莊旭昌知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 13126
• 代理人: 雷瑩

1.一種仿生礦化固定化酶和輔因子的制備方法，其特征在于包括下列步驟：

S1：將酶液溶于磷酸鹽緩沖溶液中，所述酶液中的目的酶帶有組氨酸標簽，將金屬鹽和輔因子加入酶液中，得到溶液A；所述金屬鹽中的金屬離子可與所述磷酸根離子形成礦物；所述輔因子帶有負電荷；

S2：將所述溶液A混合均勻后在常溫下靜置，生成沉淀B；

S3：將含有所述沉淀B的溶液A進行離心、洗滌，得到仿生礦化固定化酶及輔因子。

2.根據權利要求1所述的一種仿生礦化固定化酶和輔因子的制備方法，其特征在于所述磷酸鹽緩沖溶液為中性或弱堿性。

3.根據權利要求1所述的一種仿生礦化固定化酶和輔因子的制備方法，其特征在于，所述酶液與所述磷酸鹽緩沖溶液的體積比為1：8～12，所述金屬鹽與所述磷酸鹽緩沖溶液的摩爾比為1：0.8～1.2，所述輔因子和所述磷酸鹽緩沖溶液的摩爾比為1：20～500。

4.根據權利要求1所述的一種仿生礦化固定化酶和輔因子的制備方法，其特征在于所述酶液中的酶為PLP依賴型轉氨酶、FAD⁺依賴型氧化酶和NAD⁺依賴型脫氫酶中的至少一種，所述輔因子為PLP、FAD⁺和NAD⁺中的至少一種。

5.根據權利要求1-4所述的任一項仿生礦化固定化酶和輔因子的制備方法，其特征在于所述金屬鹽為鈷鹽、鎳鹽、銅鹽、鈣鹽中的至少一種。

6.根據權利要求5所述的一種仿生礦化固定化酶和輔因子的制備方法，其特征在于所述金屬鹽為硝酸鈷。

7.一種仿生礦化固定化酶和輔因子，其特征在于所述仿生礦化固定化酶和輔因子由根據權利要求1-6任一項所述的一種仿生礦化固定化酶和輔因子的制備方法制得。

8.根據權利要求7所述的一種仿生礦化固定化酶和輔因子，其特征在于所述仿生礦化固定化酶和輔因子的粒徑為9～50μm。

9.根據權利要求7所述的一種仿生礦化固定化酶和輔因子，其特征在于所述仿生礦化固定化酶和輔因子存在介孔結構。