[發(fā)明專利]經(jīng)遺傳修飾的非人動物及其使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810319216.2
• 申請日: 2013-11-05
• 公開（公告）號: CN108401987B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: R·弗拉維爾;T·施特羅維希;M·G·曼茨;C·博爾索蒂;M·多達(dá)普卡;A·J·墨菲;S·史蒂文斯;G·D·雅克波羅斯
• 申請（專利權(quán)）人: 再生元制藥公司;耶魯大學(xué);生物醫(yī)學(xué)研究院
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00
• 代理公司: 北京龍雙利達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11329
• 代理人: 孫濤;肖鸝

1.一種生成抗體的方法，該方法包括：

對經(jīng)移入的、經(jīng)遺傳修飾的、免疫缺陷的小鼠免疫接種抗原，其中該小鼠包含

基因組，所述基因組包含在小鼠IL-6基因座處與IL-6啟動子可操作連接的編碼人IL-6的核酸，和至少一種選自下組的別的核酸：

i)與SIRPa啟動子可操作連接的編碼人SIRPa的核酸；

ii)與M-CSF啟動子可操作連接的編碼人M-CSF的核酸；

ii)與IL-3啟動子可操作連接的編碼人IL-3的核酸；

iv)與GM-CSF啟動子可操作連接的編碼人GM-CSF的核酸；和

v)與TPO啟動子可操作連接的編碼人TPO的核酸；和

人造血細(xì)胞的移入，

其中在該免疫接種后，該小鼠生成包含特異性結(jié)合該抗原的抗體的人細(xì)胞，并且

其中該免疫缺陷的小鼠是SCID小鼠或RAG2^-/lL2rg-^/-小鼠。

2.權(quán)利要求1的方法，其中該編碼人IL-6的核酸替換小鼠IL-6基因基因座處的小鼠IL-6基因，且其中該IL-6啟動子是小鼠IL-6啟動子。

3.權(quán)利要求1的方法，其中該小鼠是SCID小鼠。

4.權(quán)利要求1的方法，其中該小鼠不表達(dá)RAG2且不表達(dá)IL2受體Y。

5.權(quán)利要求1的方法，其進(jìn)一步包括自所述小鼠收集小鼠的脾、淋巴結(jié)、外周血、骨髓、或其部分中至少一種。

6.權(quán)利要求5的方法，其進(jìn)一步包括自該小鼠的脾、淋巴結(jié)、外周血、骨髓、或其部分中至少一種分離該人細(xì)胞。

7.權(quán)利要求6的方法，其進(jìn)一步包括自該人細(xì)胞分離該抗體。

8.權(quán)利要求6或7的方法，其中該人細(xì)胞是人B細(xì)胞。

9.權(quán)利要求8的方法，其進(jìn)一步包括自該人B細(xì)胞生成雜交瘤細(xì)胞系。

10.權(quán)利要求9的方法，其進(jìn)一步包括自該雜交瘤細(xì)胞系分離特異性結(jié)合該抗原的抗體。

11.權(quán)利要求1的方法，其中該抗體是人IgG。

12.權(quán)利要求1的方法，其中該人造血細(xì)胞包含CD34+細(xì)胞。

13.權(quán)利要求1的方法，其中該人造血細(xì)胞是自人胎肝、人骨髓、人臍帶血、人外周血、或人脾中一種或多種獲得的。

14.權(quán)利要求1的方法，其中該抗原是肽、主要組織相容性復(fù)合物/肽復(fù)合物、DNA、活病毒、死病毒或其部分、活細(xì)菌、死細(xì)菌或其部分、和癌細(xì)胞或其部分中至少一種。

15.權(quán)利要求1的方法，其中該小鼠不表達(dá)小鼠IL-6。