[發明專利]鹽藻純化分離方法及微藻純化分離方法

在審

• 申請號: 201810317606.6
• 申請日: 2018-04-10
• 公開（公告）號: CN108220167A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 李炳乾;張云澤;劉穎芬;辛乃宏;張禮;鄭秀潔;王莘;潘娟
• 申請（專利權）人: 中鹽工程技術研究院有限公司;天津濱海索爾特生物技術中心有限公司
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12N1/02;C12R1/89
• 代理公司: 天津濱海科緯知識產權代理有限公司 12211
• 代理人: 薛萌萌

1.一種鹽藻純化分離方法，其特征在于：采用固體培養基與待分離純化的鹽藻細胞混合的方式對鹽藻純化分離。

2.根據權利要求1所述的鹽藻純化分離方法，其特征在于：采用瓊脂濃度為0.7～1.2％的固體培養基，高溫滅菌后溫度降至35～45℃，加入待分離純化的鹽藻細胞；

優選的，每1000mL0.7～1.2％濃度的瓊脂培養基在35～45℃時加入1×10³～1×10⁵個鹽藻細胞。

3.根據權利要求2所述的鹽藻純化分離方法，其特征在于：具體包括如下步驟：

步驟一：按固體培養基配方比例稱量各組分，加入除維生素外的營養鹽，高溫高壓滅菌；

步驟二：滅菌完成后置于超凈工作臺中，待溫度降至50～60℃時加入維生素，混勻；

步驟三：待培養基溫度降至35～45℃時，加入待分離純化的鹽藻細胞，混勻；

步驟四：將培養基倒入已滅菌過的培養皿中，冷卻后用封口膜密封；

步驟五：將培養皿置于28～35℃，光照強度3000～10000lx，光暗比L：D＝14h：10h條件下，讓鹽藻細胞生長繁殖；

步驟六：培養20～35天后，鹽藻在固體培養基中均勻分布多個細胞團，將單個細胞團取出單獨培養。

4.根據權利要求3所述的鹽藻純化分離方法，其特征在于：步驟一及步驟四中滅菌條件為：102.9kPa，121～126℃，20～30min。

5.根據權利要求3所述的鹽藻純化分離方法，其特征在于：步驟六中用接種環或微型鑷子將單個細胞團取出放入鹽藻液體培養基中培養。

6.根據權利要求5所述的鹽藻純化分離方法，其特征在于：步驟六中單個細胞團取出放入鹽藻液體培養基中培養條件為：28～35℃，光照強度3000～10000lx，光暗比L：D＝14h：10h。

7.根據權利要求3～6任一項所述的鹽藻純化分離方法，其特征在于：固體培養基中各組分的含量為：瓊脂濃度為0.7～1.2％、氯化鈉濃度為5～10％、硝酸鉀濃度為2～3g/L、磷酸二氫鉀濃度為0.03～0.05g/L、碳酸氫鈉濃度為1～3g/L、氯化鈣濃度為0.1～0.4g/L、乙二胺四乙酸二鈉濃度為4.36mg/L、六水三氯化鐵濃度為3.15mg/L、維生素B₁濃度為0.1～0.3mg/L、維生素B₁₂濃度為0.5～1.5ug/L、硼酸0.61mg/L、鉬酸銨0.38mg/L、氯化鋅0.041mg/L、硫酸銅0.06mg/L、氯化鈷0.051mg/L、氯化錳0.041mg/L。

8.一種微藻分離純化方法，其特征在于：利用權利要求1-7任一項所述的一種鹽藻純化分離方法對其他微藻進行純化分離。