[發(fā)明專利]一種雙抗體夾心化學(xué)發(fā)光免疫分析方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810316004.9
• 申請日: 2018-04-10
• 公開（公告）號: CN108387747A
• 公開（公告）日: 2018-08-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙利軍
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西師范大學(xué)
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京科億知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 劉振

1.一種雙抗體夾心化學(xué)發(fā)光免疫分析方法，其特征在于：采用抗RPTN N-端鼠單抗作為捕獲抗體包被于酶標(biāo)板，洗滌后加入待測血清或者RPTN標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)洗滌后加入抗RPTN C-端的兔多抗作為檢測抗體；洗滌后加入羊抗兔IgG-HRP，洗滌后加入魯米諾反應(yīng)液；洗滌后在化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上測定化學(xué)發(fā)光RLU的強(qiáng)度，RLU的強(qiáng)度代表RPTN的含量，從而測定RPTN的含量。

2.如權(quán)利要求1所述雙抗體夾心化學(xué)發(fā)光免疫分析方法，其特征在于，具體步驟如下：

分析人RPTN蛋白序列的抗原決定簇，設(shè)計(jì)N-端抗原決定簇序列，設(shè)計(jì)C-端抗原決定簇序列；將N-端抗原決定簇序列與KLH蛋白交聯(lián)后，免疫Balb小鼠，制備脾細(xì)胞，并與骨髓瘤細(xì)胞融合，然后制備N-端單抗，包被于酶標(biāo)板，作為捕獲抗體；將C-端抗原決定簇序列與KLH蛋白交聯(lián)后，免疫新西蘭大兔，制備抗C-端兔多抗，將抗C-端兔多抗作為檢測抗體；抗RPTN N-端鼠單抗作為捕獲抗體包被于酶標(biāo)板，洗滌后加入待測血清或者RPTN標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)洗滌后加入抗RPTN C-端的兔多抗作為檢測抗體；洗滌后加入羊抗兔IgG-HRP，洗滌后加入魯米諾反應(yīng)液；洗滌后在化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上測定發(fā)光RLU的強(qiáng)度，RLU的強(qiáng)度代表RPTN的含量，從而測定RPTN的含量。