[發明專利]一種釀酒酵母菌、其構建方法及其在發酵制備番茄紅素中的應用有效
| 申請號： | 201810311320.7 | 申請日： | 2018-04-09 |
| 公開（公告）號： | CN108373980B | 公開（公告）日： | 2019-12-03 |
| 發明（設計）人： | 張根林;李霞;趙金雨 | 申請（專利權）人： | 石河子大學 |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12P5/02;C12R1/865 |
| 代理公司： | 11700 北京智客聯合知識產權代理事務所(特殊普通合伙) | 代理人： | 李戍<國際申請>=<國際公布>=<進入國 |
| 地址： | 832003 新疆維吾爾*** | 國省代碼： | 新疆;65 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 釀酒酵母工程菌 構建 發酵 制備番茄紅素 宿主 合成番茄紅素 同源重組系統 組成型啟動子 酵母基因組 類異戊二烯 釀酒酵母菌 萜類化合物 多個基因 發酵成本 發酵過程 番茄紅素 合成途徑 宿主細胞 表達盒 誘導劑 底盤 酵母 菌株 通量 位點 代謝 應用 遺傳 生產 節約 優化 | ||
1.一株含有完整番茄紅素生物合成途徑的釀酒酵母菌，其特征在于，所述釀酒酵母菌命名為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae )W2，保藏單位為中國典型培養物保藏中心，保藏時間為2018年03月13日，保藏編號為CCTCC NO：M 2018123。
2.根據權利要求1所述的釀酒酵母菌的構建方法，其特征在于，是將來源于釀酒酵母CEN.PK2-1C的甲羥戊酸途徑的相關基因ERG10、ERG13、tHMG1、ERG12、ERG8和ERG19分別構建形成基因表達盒，然后運用醋酸鋰轉化法共轉化基因表達盒于釀酒酵母CEN.PK2-1C中，利用酵母同源重組能力組裝形成強化了釀酒酵母類異戊二烯合成途徑代謝通量的釀酒酵母工程菌W1；之后將來源于大腸桿菌的IDI1、嗜酸熱硫化葉菌的SaGGPS、歐文氏菌的CrtB和紅法夫酵母的CrtI分別構建形成基因表達盒，然后運用醋酸鋰轉化法共轉化基因表達盒于釀酒酵母工程菌W1中，利用酵母同源重組能力組裝形成含有完整番茄紅素生物合成途徑的釀酒酵母菌W2；具體為：將ADH1p-ERG10-SDH2t、ALA1p-ERG13-ILV1t、FBA1p-tHMG1-VPS8t、TDH3p-ERG12-PIM1t、TYS1p-ERG8-REI1t、GPM1p-ERG19-LRP1t基因表達盒利用醋酸鋰轉化法轉化到釀酒酵母CEN.PK2-1C，利用釀酒酵母的同源重組能力將外源 MVA合成途徑插入到酵母基因組rDNA位點上；將ALA1p-IDI1-RIM15t、ADH1p-SaGGPS-HOG1t、TEF1p-CrtB-CYC1t、FBA1p-CrtI-TYS1t基因表達盒利用醋酸鋰轉化法轉化到釀酒酵母工程菌 W1中，利用釀酒酵母的同源重組能力將外源番茄紅素生物合成途徑插入到酵母基因組 Delta1位點上。
3.根據權利要求1所述的釀酒酵母菌在發酵制備番茄紅素中的應用。
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