[發明專利]一種能夠識別雞新城疫病毒的表位抗體的制備方法在審

申請號：	201810308428.0	申請日：	2018-04-09
公開（公告）號：	CN108546296A	公開（公告）日：	2018-09-18
發明（設計）人：	王選年;馮春花;李鵬;孫國鵬;王利平;岳鋒;朱艷平;張艷芳;張萬方;武樂祎;任鵬舉;王亞平;王玲玲	申請（專利權）人：	新鄉學院
主分類號：	C07K16/10	分類號：	C07K16/10;C07K16/06;C07K1/22
代理公司：	新鄉市平原智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 41139	代理人：	路寬
地址：	453003 ***	國省代碼：	河南;41
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摘要：
搜索關鍵詞：	表位抗體多肽制備雞新城疫病毒篩選技術方案要點制備技術領域特異性反應新城疫病毒抗體
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【權利要求書】：

1.一種能夠識別雞新城疫病毒的表位抗體的制備方法，其特征在于具體步驟為：

（1）新城疫病毒高免血清的制備，將新城疫病毒接種于雞成纖維細胞，72h后收獲病毒，用蔗糖梯度離心的方法純化新城疫病毒，以1mg/mL的濃度肌肉注射給2周齡的小雞，當出現臨床癥狀時采集血清，用多肽P25通過ELISA方法檢測抗體滴度，將收集到的血清于56℃滅活30min，-70℃保存備用，其中多肽P25的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示；

（2）多肽P25表位抗體的制備，根據SulfoLink? Immobilization Kit試劑盒，將多肽P25稀釋到500ug/mL，標記免疫親和層析柱，將制備的新城疫病毒高免血清通過免疫親和層析柱，最后用洗脫液洗脫多肽P25表位抗體，重復2~3次，將收集到的多肽P25表位抗體于-20℃保存備用。

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