[發明專利]一種利用里氏木霉分批補料發酵高效生產β-葡萄糖苷酶的方法

在審

• 申請號: 201810307675.9
• 申請日: 2018-04-08
• 公開（公告）號: CN110343685A
• 公開（公告）日: 2019-10-18
• 發明（設計）人: 李勇昊;姚波;朱蠡慶;冉佳靈;劉丹
• 申請（專利權）人: 重慶科技學院
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12R1/885
• 代理公司: 重慶萃智邦成專利代理事務所(普通合伙) 50231
• 代理人: 竺棟

1.一種利用里氏木霉通過分批補料發酵高效生產β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于：包括下述步驟：

A：將里氏木霉接種至發酵培養基中，所述發酵培養基配方為：葡萄糖 10-15 g/L，麩皮10 g/L, 尿素0.3 g/L, (NH₄)₂SO₄ 1.4 g/L, KH₂PO₄ 2 g/L, MgSO₄?7H₂O 0.3 g/L, CaCl₂0.4 g/L, FeSO₄?7H₂O 5 mg/L, MnSO₄?H₂O 1.7 mg/L, ZnSO₄?7H₂O1.4 mg/L, CoCl₂ 2 mg/L, 吐溫80 0.2 ml/L；

B：發酵20-28 h后，待初始葡萄糖消耗完開始流加培養，流加培養方法是，當發酵液中溶氧高于21%時流加葡萄糖，當發酵液中溶氧低于19%時停止流加葡萄糖，控制溶氧在20%上下；

C：發酵80-100 h后，停止發酵。

2.根據權利要求1所述的利用里氏木霉通過分批補料發酵高效生產β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于：所述里氏木霉的菌種保藏編號為CGMCC No.12768。

3.根據權利要求1所述的利用里氏木霉通過分批補料發酵高效生產β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于：所述步驟B中流加的葡萄糖濃度為400 g/L-600 g/L。

4.根據權利要求1所述的利用里氏木霉通過分批補料發酵高效生產β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于：所述步驟A、B、C中，發酵溫度滿足流加培養之前28 -32oC，流加培養開始后24-28oC。

5.根據權利要求1所述的利用里氏木霉通過分批補料發酵高效生產β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于：發酵pH流加之前為自然pH，流加培養開始后pH不低于4.0，使用氨水調控pH。

6.根據權利要求1、2、3、4或5所述的利用里氏木霉通過分批補料發酵高效生產β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于：所述步驟A、B、C中發酵通氣量為0.8-2 vvm，氣體為無菌空氣。