[發(fā)明專利]一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒

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• 申請日: 2018-04-04
• 公開（公告）號: CN108315420A
• 公開（公告）日: 2018-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧鑫
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京天盾知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11421
• 代理人: 賀麗娟

1.一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，所述乙肝癌變易感基因檢測的多態(tài)性位點為HLA-DQrs9275319和STAT4rs2242480，所述試劑盒包括PCR反應(yīng)液1、PCR反應(yīng)液2、HLA-DQ反向擴(kuò)增引物、HLA-DQ測序引物、載玻片、蓋玻片、洗脫液和緩沖液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征是，所述PCR反應(yīng)液1含有HLA-DQ正向擴(kuò)增引物；所述PCR反應(yīng)液2含有STAT4正向擴(kuò)增引物。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征是，所述的洗脫液包括洗脫液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ如下：

20×SSC

3mmol/L Nacl

0.3mol/L檸檬酸三鈉

洗脫液Ⅰ：6×SSC，0.5％SDS；

洗脫液Ⅱ：5×SSC，0.1％SDS；

洗脫液Ⅲ：1×SSC，0.1％SDS；

洗脫液Ⅳ：0.1×SSC，0.1％SDS。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征是，所述的包括緩沖液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ：

所述的緩沖液Ⅰ如下：0.15mol/L Nacl，100mmol/L Tris，pH7.5；

所述的緩沖液Ⅱ如下：0.15mol/L Nacl，0.1mol/L Tris，3％牛血清白蛋白，pH7.5；

所述的緩沖液Ⅲ如下：0.1mol/L Nacl，0.1mol/L Tris，3％牛血清白蛋白，50mmol/LMgcl2，pH9.5。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征是，PCR的反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性5min，95℃變性10s，55℃退火20s，72℃延伸1min，30個循環(huán)后，72℃延長聚合10min，4℃保存。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征是，所述試劑盒還包括HLA-DQ陽性對照品1、HLA-DQ陽性對照品2和HLA-DQ陽性對照品3。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征是，所述試劑盒還包括STAT4陽性對照品1、STAT4陽性對照品2和STAT4陽性對照品3。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征是，所述HLA-DQ質(zhì)粒混合物中所述HLA-DQ突變純合子質(zhì)粒和所述HLA-DQ野生純合子質(zhì)粒的數(shù)量比為1:1。

9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種用于檢測乙肝癌變多態(tài)性的試劑盒，其特征是，所述STAT4質(zhì)粒混合物中所述STAT4突變純合子質(zhì)粒和所述STAT4野生純合子質(zhì)粒的數(shù)量比為1:1。