[發明專利]定量檢測血清淀粉樣蛋白A的時間分辨熒光免疫層析試紙條及其制備方法在審
| 申請號： | 201810298348.1 | 申請日： | 2018-04-04 |
| 公開（公告）號： | CN108680751A | 公開（公告）日： | 2018-10-19 |
| 發明（設計）人： | 劉佳佳;邵偉;王麗君 | 申請（專利權）人： | 蘇州遵道生物科技有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68;G01N33/558;G01N33/543 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人： | 連平 |
| 地址： | 215000 江蘇省蘇州市工業園*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 捕獲抗體 制備 時間分辨熒光免疫 層析試紙條 定量檢測 熒光微球 檢測線 質控線 偶聯 血清淀粉樣蛋白A 時間分辨熒光 硝酸纖維素膜 檢測抗體 離心洗滌 納米增強 后溶解 混合液 結合墊 噴涂于 洗滌液 包被 二抗 微球 洗滌 沉淀 溶解 | ||
1.一種定量檢測血清淀粉樣蛋白A的時間分辨熒光免疫層析試紙條的制備方法，其特征在于，所述方法包括，
硝酸纖維素膜包被檢測線與質控線，所述檢測線使用血清淀粉樣蛋白A檢測抗體，所述質控線使用抗血清淀粉樣蛋白A捕獲抗體的二抗；
制備結合墊，其包括：
含有納米增強型時間分辨熒光微球的PBS中，加入終濃度為10mg/ml的EDC與NHS，離心，沉淀經PBS洗滌后溶解于PBS中；
血清淀粉樣蛋白A捕獲抗體使用抗體洗滌液離心洗滌；
將洗滌后的血清淀粉樣蛋白A捕獲抗體與溶解有所述熒光微球的PBS混合，以使血清淀粉樣蛋白A捕獲抗體與熒光微球偶聯；
將偶聯后的混合液噴涂到載體；
其中，PBS為PH6-7、濃度0.05mol/L。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述熒光微球直徑為100nm-300nm。
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述血清淀粉樣蛋白A捕獲抗體與熒光微球混合的重量比是1/10-1/20。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，血清淀粉樣蛋白A捕獲抗體與所述熒光微球偶聯后，經封閉液封閉，然后噴涂到載體，所述封閉液含有質量百分比為0.1-1％的卡澤35及濃度為10-50mmol/ml的甘氨酸。
5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述抗體洗滌液為PH7-8的0.05mol/LPB緩沖液。
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述載體為玻璃纖維膜。
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，在抗體與熒光微球混合之后，還包括步驟：將所述血清淀粉樣蛋白A捕獲抗體與熒光微球混合液的PH值調整至7.2±0.2。
8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述每一檢測線的血清淀粉樣蛋白A檢測抗體用量為0.5-2mg。
9.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述每一質控線的抗血清淀粉樣蛋白A捕獲抗體的二抗，用量為0.5-2mg。
10.一種定量檢測血清淀粉樣蛋白A的時間分辨熒光免疫層析試紙條，由底板、樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水紙組成，其特征在于，所述試紙條由權利要求1-9任一所述的方法制得。
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