[發明專利]一種檢測水中土霉素的試劑盒的使用方法

有效

• 申請號: 201810293195.1
• 申請日: 2018-03-30
• 公開（公告）號: CN108519360B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 林雪霞;葉楚瑩;林洪貴;周樹鋒
• 申請（專利權）人: 華僑大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭;姜謐

本發明公開了一種檢測水中土霉素的試劑盒，包括一發光納米材料溶液、一A溶液和一緩沖液，發光納米材料溶液的溶質為納米材料碳點；A溶液為寡核苷酸溶液，其中的寡核苷酸的序列如SEQ ID NO 01所示，溶劑為45～55mM Tris?HCl溶液；緩沖液為450～520mM NaCl?MgCl₂?CaCl₂45～55mM Tris?HCl溶液。本發明在發光納米材料溶液\A溶液和緩沖液的共同作用下，經過簡單預處理的水樣經處理后即可以進入熒光分光儀進行檢測。由于A溶液中的寡核苷酸與土霉素能進行特異性結合形成復合體，再與納米材料碳點反應，促進了發光強度的下降。隨著土霉素含量的增加，發光強度逐漸的下降。

技術領域

本發明屬于膜清洗技術領域，具體涉及一種檢測水中土霉素的試劑盒。

背景技術

隨著抗生素的普遍使用，導致環境中存在各種人為產生的各種抗生素，長期飲用含抗生素自來水，細菌會產生耐藥基因，勢必影響生態環境平衡和人體健康。我國是抗生素生產和使用大國，占世界土霉素生產總量的65％，隨著環境中微量污染物問題被不斷提出，對這些抗生素的檢測就越來越重要，而抗生素的檢測方法稱為相關研究的重點。

土霉素Oxytetracycline(OTC)，別名地霉素，氧四環素，四環素等，屬四環素(TC)類光譜抗生素，具有良好的抑菌殺菌作用和促進動物生長發育作用，被應用于水產養殖和畜牧業中，隨著養殖用水排放流入自然環境中，污染水資源，由于四環素類抗生素往往同時存在飲用水中，因此建立四環素類抗生素的檢測方法，防止抗生素被濫用，具有十分重要的意義。

傳統檢測水中抗生素技術主要有色譜法和其聯用技術、酶免疫分析法。其中液相色譜法(LC)在廢水抗生素的檢測中是最常見的，但常需與其他技術其配合使用，需要昂貴的儀器和較長的檢測時間。其次，酶免疫分析方法對試劑的選擇性高，很難同時分析多種成分，對結構類似的化合物有一定程度的交叉，分析分子量很小的化合物和不穩定的化合物有一定的困難。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測水中土霉素的試劑盒。

本發明的技術方案如下：

一種檢測水中土霉素的試劑盒，包括：

一發光納米材料溶液，其溶質為納米材料碳點，濃度為0.8～1.2mg/mL，該納米材料碳點的激發波長為358nm，發射波長為455nm；

一A溶液，為寡核苷酸溶液，濃度為8～12μM，其中的寡核苷酸的序列如SEQ ID NO01所示，溶劑為45～55mM Tris-HCl溶液；

和一緩沖液，為450～520mM NaCl-MgCl₂-CaCl₂45～55mM Tris-HCl溶液。

在本發明的一個優選實施方案中，所述發光納米材料溶液的濃度為1mg/mL。

在本發明的一個優選實施方案中，所述A溶液的濃度為10μM，溶劑為50mM Tris-HCl 溶液。

在本發明的一個優選實施方案中，所述緩沖液為500mM NaCl-MgCl₂-CaCl₂50mMTris-HCl溶液。

上述試劑盒的使用方法，包括如下步驟：

(1)將所述發光納米材料溶液、A溶液和緩沖液以2∶1～5∶360的體積比充分混合，得混合溶液；

(2)將預處理過的水樣與上述混合溶液以1∶97～99的體積比混合均勻后，用熒光分光光度計進行檢測，檢測的激發波長為為358nm，發射波長為455nm。

在本發明的一個優選實施方案中，所述步驟(1)為：將所述發光納米材料溶液、A溶液和緩沖液以2∶5∶360的體積比充分混合，得混合溶液。