[發明專利]一種檢測水中土霉素的試劑盒的使用方法

有效

• 申請號: 201810293195.1
• 申請日: 2018-03-30
• 公開（公告）號: CN108519360B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 林雪霞;葉楚瑩;林洪貴;周樹鋒
• 申請（專利權）人: 華僑大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司 35204
• 代理人: 張松亭;姜謐

1.一種檢測水中土霉素的試劑盒的使用方法，其特征在于：該試劑盒包括：

一發光納米材料溶液，其溶質為納米材料碳點，濃度為0.8~1.2mg/mL，該納米材料碳點的激發波長為358nm，發射波長為455nm；

一A溶液，為寡核苷酸溶液，濃度為8~12μM，其中的寡核苷酸的序列如SEQ ID NO 01所示，溶劑為45~55mM Tris-HCl溶液；

和一緩沖液，為450~520mM NaCl-MgCl₂-CaCl₂ 45~55mM Tris-HCl溶液；

其使用方法包括如下步驟：

（1）將所述發光納米材料溶液、A溶液和緩沖液以2:1~5:360的體積比充分混合，得混合溶液；

（2）將預處理過的水樣與上述混合溶液以1:97~99的體積比混合均勻后，A溶液中的寡核苷酸與土霉素能進行特異性結合形成復合體，再與納米材料碳點反應，促進了發光強度的下降，用熒光分光光度計進行檢測，檢測的激發波長為358nm，發射波長為455nm。

2.如權利要求1所述的試劑盒的使用方法，其特征在于：所述發光納米材料溶液的濃度為1mg/mL。

3.如權利要求1所述的試劑盒的使用方法，其特征在于：所述A溶液的濃度為10μM，溶劑為50mM Tris-HCl溶液。

4.如權利要求1所述的試劑盒的使用方法，其特征在于：所述緩沖液為500mM NaCl-MgCl₂-CaCl₂ 50mM Tris-HCl溶液。

5.如權利要求1所述的試劑盒的使用方法，其特征在于：所述步驟（1）為：將所述發光納米材料溶液、A溶液和緩沖液以2:5:360的體積比充分混合，得混合溶液。

6.如權利要求1所述的試劑盒的使用方法，其特征在于：所述步驟（2）為：將預處理過的水樣與上述混合溶液以1:98的體積比混合均勻后，A溶液中的寡核苷酸與土霉素能進行特異性結合形成復合體，再與納米材料碳點反應，促進了發光強度的下降，用熒光分光光度計進行檢測，檢測的激發波長為358nm，發射波長為455nm。

7.如權利要求1至6中任一權利要求所述的試劑盒的使用方法，其特征在于：水樣的預處理為：經過2.5微米孔徑的濾膜過濾，再通過C18固相萃取柱處理。