[發明專利]一種寨卡病毒一步法熒光rt-PCR檢測方法及試劑盒在審
| 申請號： | 201810293046.5 | 申請日： | 2018-03-30 |
| 公開（公告）號： | CN108531647A | 公開（公告）日： | 2018-09-14 |
| 發明（設計）人： | 江振友;顏宇琦 | 申請（專利權）人： | 暨南大學 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245 | 代理人： | 陳燕嫻 |
| 地址： | 510632 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 寨卡病毒 試劑盒 一步法 特異性引物 檢測 熒光 探針 熒光定量PCR反應 核苷酸序列 血清學檢測 遺傳標志物 熒光rt-PCR 交叉反應 反應管 廣譜性 黃病毒 靈敏 應用 污染 | ||
1.一種用于檢測寨卡病毒的遺傳標記物，其特征在于：
其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.權利要求1所述的用于檢測寨卡病毒的遺傳標記物在制備檢測寨卡病毒試劑盒中的應用。
3.一種用于檢測寨卡病毒的特異性引物對，其特征在于：
上游引物序列為：5’-GGTTCTCATCAATGGTTTTGCT-3’；
下游引物序列為：5’-TGGAACAACCATCGCTCGTA-3’。
4.一種與權利要求3所述的特異性引物對配合使用的熒光探針，其特征在于：
其序列為5’-TGGCCTGGTTGGCA-3’，在所述的序列的5’端標記熒光報告基團，在其3’端標記熒光淬滅基團。
5.權利要求3所述的用于檢測寨卡病毒的特異性引物對和/或權利要求4所述的熒光探針在制備檢測寨卡病毒試劑盒中的應用。
6.一種檢測寨卡病毒試劑盒，其特征在于：
含有權利要求3所述的用于檢測寨卡病毒的特異性引物對。
7.根據權利要求6所述的檢測寨卡病毒試劑盒，其特征在于：
還包含權利要求4所述的熒光探針。
8.一種寨卡病毒一步法熒光rt-PCR檢測方法，其特征在于：
利用如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示的特異性引物對和SEQ ID NO.3所示的熒光探針進行實時熒光定量PCR，檢測待測樣本中的寨卡病毒。
9.根據權利要求8所述的寨卡病毒一步法熒光rt-PCR檢測方法，其特征在于：
在所述的熒光rt-PCR的反應體系中，所述的引物的終濃度為0.1～1μM；所述的熒光探針的終濃度為0.1～0.5μM。
10.根據權利要求8所述的寨卡病毒一步法熒光rt-PCR檢測方法，其特征在于：
所述的實時熒光定量PCR反應條件為：42℃反轉錄5min，95℃，預變性10s；95℃變性5s，60℃熒光檢測34s，40個循環。
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