[發(fā)明專利]一種生物介質(zhì)穩(wěn)定的雙敏感型的癌癥聯(lián)合治療系統(tǒng)及構(gòu)建方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810285002.8
• 申請日: 2018-04-02
• 公開（公告）號: CN108524944B
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發(fā)明（設計）人: 張靜;沈彪
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學
• 主分類號: A61K47/52
• 分類號: A61K47/52;A61K47/04;A61K47/42;A61K31/704;A61K38/16;A61P35/00
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

1.一種生物介質(zhì)穩(wěn)定的雙敏感型的癌癥聯(lián)合治療系統(tǒng)，其特征在于，雙敏感型癌癥聯(lián)合治療系統(tǒng)以介孔硅為基體，在介孔硅上同時負載抗癌藥物與細胞凋亡肽，并在介孔硅的最外層包覆牛血清蛋白；

介孔硅通過以下過程負載細胞凋亡肽：

介孔硅與3-巰基丙基三甲氧基硅烷反應得到巰基修飾的介孔硅MSN-SH，再與S-(2-氨基乙硫基)-2-硫代吡啶鹽酸鹽反應得到表面連接有雙硫鍵的介孔硅MSN-SS-NH₂，再與溴代丙炔、三乙胺反應炔基修飾雙硫鍵的介孔硅MSN-SS-alkyne，再與端部有疊氮基團的細胞凋亡肽N₃-KLA、CuSO₄·5H₂O與抗壞血酸鈉反應得到連接接有細胞凋亡肽的介孔硅MSN-SS-KLA；在介孔硅的最外層包覆牛血清蛋白的方法為：

將負載抗癌藥物和細胞凋亡肽的介孔硅DOX@MSN-SS-KLA分散到水中，滴加牛血清蛋白BSA室溫攪拌過夜。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的癌癥聯(lián)合治療系統(tǒng)，其特征在于，細胞凋亡肽通過還原敏感的雙硫鍵連接到介孔硅的表面上。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的癌癥聯(lián)合治療系統(tǒng)，其特征在于，所述抗癌藥物為鹽酸阿霉素DOX·HCl，并負載在介孔硅的孔道內(nèi)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的癌癥聯(lián)合治療系統(tǒng)，其特征在于，介孔硅的粒徑為50～100nm。

5.如權(quán)利要求1至4任一所述的癌癥聯(lián)合治療系統(tǒng)的構(gòu)建方法，包括以下步驟：

(1)制備介孔硅：以正硅酸四乙酯、三乙胺和十六烷基三甲基氯化銨CTAC為原料制備CTAC修飾的介孔硅CTAC@MSN；

(2)制備表面雙硫化的介孔硅：室溫下將CTAC@MSN與3-巰基丙基三甲氧基硅烷在甲醇中混合攪拌反應，離心洗滌后干燥，再抽洗掉CTAC得到巰基修飾的介孔硅MSN-SH，然后與S-(2-氨基乙硫基)-2-硫代吡啶鹽酸鹽在甲醇中混合反應，再離心、洗滌并干燥得到表面連接有雙硫鍵的介孔硅MSN-SS-NH₂；

(3)制備炔基修飾的雙硫化的介孔硅：室溫將MSN-SS-NH₂分散到甲醇中，滴加溴代丙炔、三乙胺反應，使炔基替代氨基連接到雙硫鍵上，得炔基修飾雙硫鍵的介孔硅MSN-SS-alkyne；

(4)負載細胞凋亡肽：室溫將MSN-SS-alkyne分散到甲醇中，依次加入端部有疊氮基團的細胞凋亡肽N₃-KLA、CuSO₄·5H₂O與抗壞血酸鈉，氮氣氛圍下反應，然后離心、洗滌得到連接接有細胞凋亡肽的介孔硅MSN-SS-KLA；

(5)負載抗癌藥物：將MSN-SS-KLA分散到甲醇中，加入抗癌藥物后劇烈攪拌過夜，待負載的抗癌藥物為DOX·HCl，然后透析得到負載抗癌藥物的介孔硅DOX@MSN-SS-KLA；

(6)牛血清蛋白包覆：將DOX@MSN-SS-KLA分散到去離子水中，然后滴加牛血清蛋白BSA，室溫攪拌過夜后離心、洗滌得到BSA包覆的介孔硅DOX@MSN-SS-KLA/BSA。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(2)中制備巰基修飾的介孔硅MSN-SH時CTAC@MSN、甲醇和3-巰基丙基三甲氧基硅烷質(zhì)量比1:100～150:3～5，反應時間24～36h。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(2)中制備氨基修飾的雙硫化的介孔硅MSN-SS-NH₂時MSN-SH、甲醇和S-(2-氨基乙硫基)-2-硫代吡啶鹽酸鹽的質(zhì)量比為1:200～300:1～4，反應時間為24～36h。

8.根據(jù)權(quán)利要求5述的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟(3)中MSN-SS-NH₂、甲醇、溴代丙炔和三乙胺的質(zhì)量比為1:200～300:8.0:0.2～0.5，反應時間為24～36h。