[發明專利]適用于評價卷煙煙氣冷凝物遺傳毒性的TK基因突變測試方法、致突變強度確定方法有效
| 申請號: | 201810284779.2 | 申請日: | 2018-04-02 |
| 公開(公告)號: | CN108531554B | 公開(公告)日: | 2021-10-01 |
| 發明(設計)人: | 尚平平;華辰鳳;李翔;喬梁峻;謝復煒 | 申請(專利權)人: | 中國煙草總公司鄭州煙草研究院 |
| 主分類號: | C12Q1/6827 | 分類號: | C12Q1/6827 |
| 代理公司: | 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119 | 代理人: | 牛愛周 |
| 地址: | 450001 *** | 國省代碼: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 適用于 評價 卷煙 煙氣 冷凝物 遺傳 毒性 tk 基因突變 測試 方法 突變 強度 確定 | ||
1.一種卷煙煙氣冷凝物的致突變強度確定方法,其特征在于:包括如下步驟:收集卷煙煙氣冷凝物,制備得到系列濃度的卷煙煙氣冷凝物溶液;采用加入所述卷煙煙氣冷凝物溶液的細胞培養基染毒處理受試細胞,然后計算卷煙煙氣冷凝物的抗性突變頻率TMF,選出致突變陽性的卷煙煙氣冷凝物,將所述含致突變陽性的卷煙煙氣冷凝物的劑量與TMF值進行線性擬合,所得直線的斜率即為致突變強度。
2.根據權利要求1所述的致突變強度確定方法,其特征在于:所述卷煙煙氣冷凝物溶液的制備包括:吸煙機抽吸溫濕度平衡后卷煙,收集濾片,用二甲基亞砜萃取得到卷煙煙氣冷凝物溶液。
3.根據權利要求1所述的致突變強度確定方法,其特征在于:在所述染毒處理時另外設置陽性對照組和溶劑對照組,所述陽性對照組加入環磷酰胺,所述溶劑對照組加入二甲基亞砜。
4.根據權利要求3所述的致突變強度確定方法,其特征在于:所述致突變陽性的判斷為:煙氣冷凝物一個以上劑量組的TMF顯著高于二甲基亞砜溶劑對照組,或是溶劑對照組的3倍以上,并有劑量反應關系則為致突變陽性;卷煙煙氣冷凝物各劑量組未見突變頻率增加則為致突變陰性。
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