[發(fā)明專利]墨魚高F值寡肽以及其制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810283088.0
• 申請日: 2018-04-02
• 公開（公告）號: CN108517004A
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 葛嘯虎;陳海佳;王一飛;王小燕
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州賽萊拉干細(xì)胞科技股份有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C12P21/02;C07K1/16;C07K1/14
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 歐陽柏樂

本發(fā)明涉及一種墨魚高F值寡肽以及其制備方法。其中，一種墨魚高F值寡肽，所述高F值寡肽包含若干如下肽段：肽段M1的序列為SEQ ID NO.1：Tyr?Cys?Trp?Ala?Val?Lys?Phe?Leu?Tyr；肽段M2的序列為SEQ ID NO.2：Leu?Val?Thr?Arg?Tyr?Gln?Val。首次從墨魚中制備出純度高、肽段序列已知的墨魚高F值寡肽，且上述高F值寡肽F值高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及活性肽制備技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及墨魚高F值寡肽以及其制備方法。

背景技術(shù)

墨魚是貝類，亦稱烏賊魚、墨斗魚、目魚等。屬軟體動物門，頭足綱，十腕目，烏賊科。中國所指的“墨魚”或叫“烏賊”，大多是中國東海主產(chǎn)的曼氏無針烏賊和金烏賊兩個種。

兩者的外形差別不大，主要差別是：前者胴部卵圓形，稍瘦，無骨針，干制品叫螟蟲甫鲞；后者有骨針，干制品叫烏賊干。烏賊遇到強(qiáng)敵時會以噴墨作為逃生的方法并伺機(jī)離開，因而有“烏賊”、墨魚等名稱。其皮膚中有色素小囊，會隨“情緒”的變化而改變顏色和大小。烏賊會躍出海面，具有驚人的空中飛行能力。墨魚殼，既烏賊板，學(xué)名叫烏賊骨，也是中醫(yī)上常用的藥材，稱海螵蛸，是一味制酸、止血、收斂之常用中藥。墨魚中含有豐富的氨基酸、蛋白質(zhì)、多肽，墨魚提取物是生物活性肽的優(yōu)良資源。

高F值寡肽是一類由2-9個氨基酸以獨(dú)特的方式組合成的小肽混合物，其氨基酸混合物中支鏈氨基酸與芳香族氨基酸質(zhì)量比值遠(yuǎn)高于正常人體中的比值。在臨床上，高F值寡肽的F值的高低往往與生理活性密切相關(guān)，F(xiàn)值高、純度高的高F值寡肽常用來治療肝性腦病，苯丙酮尿癥，改善病人術(shù)后的營養(yǎng)狀況等。但是，現(xiàn)有的高F值寡肽F值和純度都不高，多為混合肽，且肽的氨基酸序列多處于未知，而現(xiàn)有制備工藝復(fù)雜，且提取率小，不便于大規(guī)模生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，有必要提供一種純度高、肽段序列已知的墨魚高F值寡肽。

一種墨魚高F值寡肽，所述高F值寡肽包含若干如下肽段：

肽段M1的序列為SEQ ID NO.1：Tyr-Cys-Trp-Ala-Val-Lys-Phe-Leu-Tyr；

肽段M2的序列為SEQ ID NO.2：Leu-Val-Thr-Arg-Tyr-Gln-Val。

首次從墨魚中制備出純度高、肽段序列已知的墨魚高F值寡肽，且上述高F值寡肽F值高。

本發(fā)明還提供了一種的墨魚高F值寡肽的制備方法。

包括下述步驟：

將墨魚研磨，然后將研磨后的墨魚按1:1-1:1.5加入蒸餾水中，并向攪碎的墨魚中接種質(zhì)量份數(shù)為1％-2％納豆芽孢桿菌，然后控制發(fā)酵溫度35℃-45℃，發(fā)酵78h-96h得發(fā)酵液；

將活性炭裝入層析柱中，所述發(fā)酵液流經(jīng)裝有活性炭的層析柱，然后干燥制得寡肽粉末A；

凝膠層析，干燥得寡肽粉末B；

高效液相色譜梯度洗脫，收集洗脫液，干燥，制得墨魚高F值寡肽。

上述墨魚高F值寡肽的制備方法簡單，省去了常規(guī)的兩步法酶水解步驟。并采用活性炭替代活性炭進(jìn)行動態(tài)脫芳，對芳香族氨基酸吸附效果好，且可以盡可能保留支鏈氨基酸，最終制備的墨魚高F值寡肽F值高，且首次從墨魚中制備出已知肽段序列的墨魚高F值寡肽。

在其中一個實(shí)施例中，一種墨魚高F值寡肽的制備方法，包括下述步驟：

將墨魚研磨，然后將研磨后的墨魚按1:1-1:1.5加入蒸餾水中，得到攪碎的墨魚，并向攪碎的墨魚中接種質(zhì)量份數(shù)為1％-2％納豆芽孢桿菌，然后控制發(fā)酵溫度35℃-45℃，發(fā)酵78h-96h得發(fā)酵液；