[發明專利]墨魚高F值寡肽以及其制備方法在審
| 申請號: | 201810283088.0 | 申請日: | 2018-04-02 |
| 公開(公告)號: | CN108517004A | 公開(公告)日: | 2018-09-11 |
| 發明(設計)人: | 葛嘯虎;陳海佳;王一飛;王小燕 | 申請(專利權)人: | 廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司 |
| 主分類號: | C07K7/06 | 分類號: | C07K7/06;C12P21/02;C07K1/16;C07K1/14 |
| 代理公司: | 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人: | 歐陽柏樂 |
| 地址: | 510000 廣東省廣州市廣州開發*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 高F值寡肽 肽段 制備 肽段序列 | ||
1.一種墨魚高F值寡肽,其特征在于,所述高F值寡肽包含若干如下肽段:
肽段M1的序列為SEQ ID NO.1:Tyr-Cys-Trp-Ala-Val-Lys-Phe-Leu-Tyr;
肽段M2的序列為SEQ ID NO.2:Leu-Val-Thr-Arg-Tyr-Gln-Val。
2.一種墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于,包括下述步驟:
將墨魚研磨,然后將研磨后的墨魚按1:1-1:1.5加入蒸餾水中,得到攪碎的墨魚,并向攪碎的墨魚中接種質量份數為1%-2%納豆芽孢桿菌,然后控制發酵溫度35℃-45℃,發酵78h-96h得發酵液;
將活性炭裝入層析柱中,所述發酵液流經裝有活性炭的層析柱,然后干燥制得寡肽粉末A;
凝膠層析,干燥得寡肽粉末B;
高效液相色譜梯度洗脫,收集洗脫液,干燥,制得墨魚高F值寡肽。
3.根據權利要求2所述的墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于,在攪碎的墨魚中接種質量份數為1%-2%納豆芽孢桿菌后,再向所述攪碎的墨魚中接種0.8%-1.2%胃蛋白酶。
4.根據權利要求3所述的墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于,所述活性炭的粒徑為100目-200目。
5.根據權利要求2所述的墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于,所述濾液在所述層析柱的流速為0.6mL/min-1.2mL/min。
6.根據權利要求2所述的墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于,所述活性炭中摻雜納米氧化鋅或納米氧化錳中的一種或多種。
7.根據權利要求6所述的墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于,按重量份計,所述納米氧化鋅的加入量為0.6%-1.0%、所述納米氧化錳的加入量為2.0%-4.0%。
8.根據權利要求2所述的墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于:所述的凝膠層析中選用洗脫液為超純水,超純水的流速為0.32mL/min-0.45mL/min,每1.8-2.2min收集1管。
9.根據權利要求2所述的墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于,所述高效液相色譜純化的條件為:采用梯度洗脫,洗脫時間、洗脫液成份及其百分比和流速依次為:0-15min,乙腈35%,超純水65%,流速為0.12-0.22mL/min;16-50min,乙腈80%,超純水20%,流速為0.35-0.52mL/min;51-70min,乙腈20%,超純水80%,流速0.64-0.70mL/min。
10.根據權利要求2所述的墨魚高F值寡肽的制備方法,其特征在于,所述干燥為冷凍干燥。
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