[發明專利]一種雙黃連口服制劑指紋圖譜測定方法

有效

• 申請號: 201810278928.4
• 申請日: 2018-03-30
• 公開（公告）號: CN108760903B
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發明（設計）人: 高燕;呂凌;劉青;丁曉彥;趙渤年
• 申請（專利權）人: 山東中醫藥大學;山東省中醫藥研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

本發明涉及一種雙黃連口服制劑指紋圖譜測定方法，屬于藥物分析技術領域。該測定方法通過以下步驟實現：制備對照品溶液、供試品溶液，最后利用高效液相色譜?質譜進行分析檢測。本發明采用不同的洗脫條件分進行HPLC檢測，達到了良好的分離效果。本發明選用外加內標法，對含有內標物質的供試液進行指紋圖譜的測定，采用共有峰與內標峰的相對峰面積比值作為該指紋圖譜的數學表達，這樣比通常選用中藥自身成分做參照計算各共有峰的相對峰面積，更能體現各共有峰含量的絕對變化與相對變化。

技術領域

本發明涉及一種雙黃連口服制劑指紋圖譜測定方法，屬于藥物分析技術領域。

背景技術

雙黃連方劑由銀翹散（《溫病條辨》）精簡化裁而來，是由雙花（金銀花）、黃芩、連翹三味中藥所組成的現代中藥復方制劑，具有辛涼解表、清熱解毒的作用，是外感風熱所致感冒的常用藥，藥理研究表明，具有良好的抗菌、抗病毒、解熱抗炎等作用，是目前臨床治療呼吸道感染性疾病的首選藥物之一。 《中國藥典》從2000年收入，發展到2015年版（一部），其載入口服劑型已有口服液、片劑、顆粒劑和膠囊劑四種劑型，市場上獲得國家食品藥品監督管理總局批準，獲得國藥準字的生產企業共49家，其中片劑（片劑、含片、泡騰片、咀嚼片、分散片）18家，膠囊劑（包括軟膠囊）9家，顆粒劑4家，口服液12家，糖漿劑3家，滴丸2家，合劑1家。面對如此之多的生產廠家，該制劑的質量穩定均一可控至關重要。

面對中藥成分的復雜多樣性，指紋圖譜技術應運而生。指紋圖譜包括了對已知成分和未知成分的分析，反映的化學成分信息（具體表現為相對保留時間和相對峰面積）具有高度特異性和選擇性，可較充分地反映出中藥復雜混合體系中各種化學成分量分布的整體狀況，尤其是在現階段有效成分絕大多數沒有明確的情況下，能夠結合各種色譜、光譜、波譜手段，特征性地鑒定中藥的真偽與優劣，成為中藥自身的“化學條碼”。

文獻《高效液相色譜-電噴霧串聯四極桿質譜定性分析雙黃連粉針中化學成分及其藥味歸屬》提供了一種采用液相色譜-電噴霧串聯四極桿質譜法分析雙黃連粉針中的化學分，通過質譜分析及文獻對照，從雙黃連粉針圖譜中共準確推斷43個峰的相對分子質量，推導出20個化合物，并對各化合物進行了藥味歸屬。運用質譜技術，可以對指紋圖譜中的色譜峰進行定性，但色譜圖中由于各色譜峰沒有達到有效分離，很難對色譜圖中共有峰進行準確定量評價。

中國專利申請201510299374.2提供了一種對雙黃連口服液中的5個成分進行的分離鑒定，鑒定成分少，雙黃連制劑中，成分繁多，在指紋圖譜檢測中，需盡可能多的對藥物成分進行指紋圖譜表達和有效分離，這樣才能對其成分進行精準定量，對藥物質量進行客觀評價。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明目的在于建立一種準確、靈敏、重復性好的雙黃連口服制劑指紋圖譜測定方法，作為雙黃連口服制劑質量控制的技術手段，另一方面是為將來建立雙黃連口服制劑譜-效相關質量評價系統提供技術方法和數據支撐。

為達到良好的分離效果，本試驗采用兩種色譜方法分兩段對樣品進行采集檢測，同時創新性地在復雜的指紋圖譜中定量加入一個內標峰，以共有峰與內標峰的相對峰面積比值作為該指紋圖譜的數學表達，這樣比通常選用中藥自身成分做參照計算各共有峰的相對峰面積，更能體現各共有峰含量的絕對變化與相對變化。

本發明為了實現上述目的所采用的技術方案為：

本發明提供了一種雙黃連口服制劑指紋圖譜測定方法，包括以下步驟：

（1）對照品溶液的制備：稱取紫草酸、黃芩苷、連翹苷、丹皮酚、槲皮素、黃芩素、木犀草苷、隱綠原酸、新綠原酸、牛蒡子苷、咖啡酸、異連翹苷、連翹酯苷A、連翹酯苷B、異綠原酸A、異綠原酸B、異綠原酸C、迷迭香酸、千層紙素、白楊素、漢黃芩苷、漢黃芩素對照品，用70%甲醇稀釋即得；