[發明專利]一種生物制品疫苗甲醛殘留量的測定方法

在審

• 申請號: 201810276527.5
• 申請日: 2018-03-30
• 公開（公告）號: CN108426847A
• 公開（公告）日: 2018-08-21
• 發明（設計）人: 付春杰;李莉;金燕斌;陳宏;朱長動;宋海巖;張丹;石瑩;孟令偉;張麗娜;楊柳;杜鑫;高曉慶;唐東雪;王博;程杰;曾曉敏;劉金偉
• 申請（專利權）人: 吉林冠界生物技術有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 齊云

1.一種生物制品疫苗甲醛殘留量的測定方法，其特征在于，包括：

a)用5.0ml刻度移液管取被檢疫苗樣品5.0ml，置50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，強烈振搖，靜止分層，下層液如果不澄清，濾過，棄去初濾液，取澄清續濾液，得到供試品溶液；

b)用刻度移液管取已標定的甲醛溶液配成每l.0ml含甲醛1.0mg的溶液，精密量取上述稀釋溶液5.0ml置50ml容量瓶中，用10ml刻度移液管加20％吐溫-80乙醇溶液10ml，再加水至刻度，搖勻，得到對照品溶液；

其中，步驟a)和b)無先后順序；

c)用1.0ml刻度移液管精密吸取所述供試品溶液和所述對照品溶液各0.5ml，分別加醋酸-醋酸銨緩沖液10ml、乙酰丙酮試液10ml，置60℃水浴鍋恒溫水浴15分鐘，冷水冷卻5分鐘，放置20分鐘后，按紫外-可見分光光度法《中華人民共和國獸藥典》附錄，用紫外分光光度計在410nm的波長處測定吸收度，計算即得；

計算公式為：

甲醛溶液(40％)含量％(g/ml)＝0.0025×(供試品溶液的吸收度÷對照品溶液的吸收度)×100％；

所述方法還包括測定結果的不確定度評定方法，包括如下步驟：

按照下述公式計算測定結果的合成標準不確定度：

u＝[u²_(供試品)+u²_(對照品)+u²_{(甲醛標定)}+u²_{(醋酸-醋酸銨)}+u²_{(乙酰丙酮)}]^1/2；

式中，u_(供試品)、u_(對照品)、u_{(甲醛標定)}、u_{(醋酸-醋酸銨)}、u_{(乙酰丙酮)}分別對應供試品溶液配制與檢測、對照品溶液配制與檢測、甲醛溶液標定、醋酸-醋酸銨緩沖液配制、乙酰丙酮試液配制產生的不確定度分量；

甲醛殘留量測定的擴展不確定度＝2u。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟a)中，當所述被檢疫苗樣品為油乳劑疫苗時，在用5.0ml刻度移液管取被檢疫苗樣品5.0ml，置50ml量瓶中之后、加水稀釋至刻度之前還包括：

用20％吐溫-80乙醇溶液l0ml，分次洗滌吸管，洗液并入50ml量瓶中，搖勻。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述供試品溶液配制與檢測產生的不確定度分量u_(供試品)＝[u²_(樣稀釋)+u²_(樣測定)+u²_(z)+u²_(s)]^1/2；

其中，式中u_(z)為所述紫外線分光光度計引入的不確定度分量；u_(s)為所述水浴鍋引入的不確定度分量；u_(樣稀釋)為被檢疫苗樣品稀釋至50ml容量瓶時引入的不確定度分量；u_(樣測定)為在步驟c)中對被檢疫苗樣品進行測定時引入的不確定度分量。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述對照品溶液配制與檢測產生的不確定度分量u_(對照品)＝[u²_{(對照稀釋)}+u²_{(對照測定)}+u²_(z)+u²_(s)]^1/2；

其中，式中u_(z)為所述紫外線分光光度計引入的不確定度分量；u_(s)為所述水浴鍋引入的不確定度分量；u_{(對照稀釋)}為用刻度移液管取已標定的甲醛溶液配成每l.0ml含甲醛1.0mg的溶液，精密量取上述稀釋溶液5.0ml置50ml容量瓶中時引入的不確定度分量；u_{(對照測定)}為在步驟c)中對對照品進行測定時引入的不確定度分量。