[發明專利]人源化GHR106單克隆抗體的嵌合抗原受體構建體及核酸分子與應用

有效

• 申請號: 201810275498.0
• 申請日: 2018-03-30
• 公開（公告）號: CN108484778B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發明（設計）人: 李吉祐
• 申請（專利權）人: 李吉祐
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

本發明提供了人源化GHR106單克隆抗體的嵌合抗原受體構建體及核酸分子與應用，所述構建體具有序列表7所示核苷酸序列，所述核酸包含該構建體，可應用于免疫細胞，對于腫瘤的治療具有重要應用價值。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其是一種人源化GHR106單克隆抗體的嵌合抗原受體構建體及核酸分子與應用。

背景技術

促性腺激素釋放激素(GnRH)受體位于特定細胞類型的外膜上。通過與GnRH受體的特異性結合，腦下垂體前葉會釋放GnRH。GnRH為一種能夠刺激促性腺激素(促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH))釋放的十肽激素。研究發現，GnRH或其類似物可以對癌細胞具有抗增殖作用(Pati,D.,et a l.,Endocrin(1995)136:75-84；Choi,K.C.,et al.,J ClinEndocrinolMetab(2001)86:5075-5078,)。GnRH類似物已被用于治療人類不同的癌癥和生育調節上的疾病。

GHR106單克隆抗體是由被對應于人類GnRH受體的細胞外結構域的合成肽免疫的老鼠所產生。GHR106表現為GnRH類似物，但GHR106擁有比本領域其它已知的GnRH類似物更長的半衰期。GnRH類似物在這數十年來已被用于治療人類不同的癌癥以及生育調節上的疾病。

美國專利號9,273,138(2016年3月1日)公開了鼠源化GHR106和人源化GHR106的核苷酸和氨基酸序列。生物化學和免疫學實驗證實，鼠源化GHR106和人源化GHR106對人類GnRH受體的細胞外結構域具有高特異性和親和力，而這些結構域在許多不同組織起源的癌細胞表面上都有表達。此外，這兩種形式的GHR106與GnRH肽類似物雷同，可以誘導癌細胞的體外凋亡，但與GnRH肽類似物不同的是這兩種形式的GHR106還可以誘導癌細胞的補體依賴性細胞毒性反應。

T細胞療法(CAR-T)技術中的嵌合抗原受體(CAR)結合了T細胞免疫療法，基因療法和免疫療法。CAR-T已被用于癌癥治療。嵌合抗原受體T細胞免疫療法(CAR-T)修飾患者的T細胞，讓T細胞表達CAR抗原受體，而讓其識別腫瘤細胞上的表面抗原。使用CAR-T治療癌癥的嘗試取得了一些成功。通過使用CD19相關的CAR平臺去治療不同類型的血液癌癥就是一些成功的實例。US8916381公開了一種用CAR-T治療白血病的方法。Brentijens等人(Molecular Therapy:Treatment of Chronic Lymphocytic Leukemia with GeneticallyTargeted Autologous T Cells:Case Report of an Unforeseen Adverse Event in aPhase I Clinical Trial.18Vol.Elsevier,04/01/2010)進行了用CAR-T治療慢性淋巴細胞性白血病的臨床試驗。修飾過的T細胞能夠識別在大多數B細胞惡性腫瘤上表達的CA19。

盡管如此，這些選擇性靶向和殺死癌細胞的構建體和方法仍然有需要改進的地方。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種人源化GHR106單克隆抗體的嵌合抗原受體構建體。

本發明所要解決的另一技術問題在于提供具有上述構建體的核酸分子。

本發明所要解決的另一技術問題在于提供上述核酸分子的應用。

為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：

一種人源化GHR106單克隆抗體的嵌合抗原受體構建體，為信號肽(Signalpeptide)–GHR106scFv–CD8-4-1BB-cD3Z-2A-IL7，其核苷酸序列為圖2D所述序列，具有序列表7所示核苷酸序列。

優選的，上述人源化GHR106單克隆抗體的嵌合抗原受體構建體，其氨基酸為圖2E所述序列，具有序列表8所示氨基酸序列。