[發明專利]檢測抗小麥白粉病Pm57基因的通用分子標記、引物、檢測方法及應用

有效

• 申請號: 201810267752.2
• 申請日: 2018-03-29
• 公開（公告）號: CN108179223B
• 公開（公告）日: 2021-01-26
• 發明（設計）人: 劉文軒;董振杰;夏晴;麥艷娜;馬超;李歡歡
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 西安銘澤知識產權代理事務所(普通合伙) 61223
• 代理人: 俞曉明

本發明屬于小麥基因檢測技術領域，具體涉及一種檢測抗小麥白粉病Pm57基因的通用分子標記、引物、檢測方法及應用。所述通用分子標記為分子標記X185442，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述引物的序列為：上游引物185442F：5’?GCACGGTGGGTGTGTTCC?3’和下游引物185442R：5’?CTCACTATGATGTGTGAGGTTCTT?3’。本發明提供的分子標記X185442能夠同時檢測出小麥?西爾斯山羊草染色體2S^S#1添加系2011?400和易位系89(6)88、89(5)69、89?346這幾種材料所含Pm57基因，通用性和檢測效率高，降低了工作繁瑣度。同時我們對分子標記X185442的PCR擴增體系進行優化，獲得了與該分子標記X185442配套的高效的PCR體系及檢測方法。

技術領域

本發明屬于小麥基因檢測技術領域，具體涉及一種檢測抗小麥白粉病Pm57基因的通用分子標記、引物、檢測方法及應用。

背景技術

Pm57基因是我們從西爾斯山羊草(Aegilops searsii,2n＝2x＝14,S^SS^S)轉移到普通小麥的一個抗白粉病新基因，可有效預防小麥白粉病的發生，在小麥育種領域具有廣泛的應用前景。因此，研究Pm57基因的功能與應用具有重要的生物學意義。Pm57基因位于西爾斯山羊草2S^S#1染色體長臂近端部，小麥-西爾斯山羊草染色體2S^S#1添加系2011-400和易位系89(6)88、89(5)69、89-346所具有的2S^S片段上都含有抗白粉病Pm57基因。

但是由于每個小麥品種的基因型不同，目前尚沒有能夠同時檢測小麥-西爾斯山羊草染色體2S^S#1添加系2011-400和易位系89(6)88、89(5)69、89-346這幾種材料所含Pm57基因的通用分子標記的報導。雖然現有技術中已有與Pm57基因連鎖的分子標記X2L4g9p4/HaeIII，但開發X2L4g9p4/HaeIII標記的全長cDNA(AK331687)位于小麥第二同源群長臂的FL0.86-0.91之間，該分子標記不能檢測89(6)88抗病材料所攜帶的Pm57基因，不具有通用性，在分子標記輔助選擇方面應用有限。因此，研發一種能夠同時檢測出小麥-西爾斯山羊草染色體2S^S#1添加系2011-400和易位系89(6)88、89(5)69、89-346這幾種材料所含Pm57基因的通用分子標記尤為必要。

發明內容

本發明提供的一種檢測抗小麥白粉病Pm57基因的通用分子標記、引物、檢測方法及應用，該通用分子標記能夠同時檢測出小麥-西爾斯山羊草染色體2S^S#1添加系2011-400和易位系89(6)88、89(5)69、89-346這幾種材料所含Pm57基因，檢測效率高，降低了工作繁瑣度。

本發明的第一個目的是提供一種檢測抗小麥白粉病Pm57基因的通用分子標記，所述通用分子標記為分子標記X185442，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本發明的第二個目的是提供一種用于擴增所述通用分子標記的引物，所述引物的序列為：

上游引物185442F：5’-GCACGGTGGGTGTGTTCC-3’

下游引物185442R：5’-CTCACTATGATGTGTGAGGTTCTT-3’。

本發明的第三個目的是提供一種利用所述引物檢測抗小麥白粉病Pm57基因的方法，具體包括以下步驟：

S1，提取待檢測小麥的基因組DNA；

S2，以所述小麥的基因組DNA為模板，以上游引物185442F和下游引物185442R為引物進行PCR擴增；