[發(fā)明專利]通過(guò)有性繁殖菌種將家蠶培育成蠶蟲草的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810264555.5
• 申請(qǐng)日: 2018-03-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108496694B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-06-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李祥麟;伏迪;蘭茹;汪永生;張馳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州雷旦生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A01G18/00
• 分類號(hào): A01G18/00;A01K67/04
• 代理公司: 南京利豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 32256
• 代理人: 王鋒;趙世發(fā)

本發(fā)明公開(kāi)了一種通過(guò)有性繁殖菌種將家蠶培育成蠶蟲草的方法，包括：采用有性繁殖的方式培養(yǎng)蠶蟲草母種，并制備形成菌液：選擇子囊果孢子的子座長(zhǎng)度為4?5cm的蟲草，使其在無(wú)菌條件下彈射出孢子，孢子落入PDA培養(yǎng)基中形成菌種；將形成的菌種于液態(tài)培養(yǎng)基中形成菌絲，將生長(zhǎng)有菌絲的液態(tài)培養(yǎng)基稀釋形成懸浮液，之后將所述懸浮液與殼聚糖復(fù)合物混合形成噴淋液；選擇蠶蟲，并采用乙醇和丙三醇的混合液消毒吹干，將消毒后的蠶蟲轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)室中采用表面形成有所述噴淋液的桑葉喂養(yǎng)3?5天，并采用所述懸浮液保持培養(yǎng)室內(nèi)的濕度為65?70％，保持培養(yǎng)室內(nèi)的溫度為18?21℃。本發(fā)明提供的方法通過(guò)喂食的方式將蟲草菌植入蠶蟲體內(nèi)，大大提高了蟲草菌植入的效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明特別涉及一種通過(guò)有性繁殖菌種將家蠶培育成蠶蟲草的方法，屬于蟲草培育技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

蛹蟲草Cordyceps militaris(La.:Fr)，又名北冬蟲夏草，屬于真菌門(Eumycota)，子囊菌亞門(Aseomycotina)，肉座菌目(Hypocreales)，麥角菌科(Clavicipitaceae)，蟲草屬(Cordyceps)。是寄生于夜蛾科等蛹體上的不同于冬蟲夏草的另一種蟲草。現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)進(jìn)一步證明了家蠶幼蟲體的藥用價(jià)值，推動(dòng)了家蠶幼蟲的藥用產(chǎn)品開(kāi)發(fā)與臨床應(yīng)用。5齡家蠶幼蟲體內(nèi)含有大量具有重要生理活性的物質(zhì)，因此五齡第3天的家蠶幼蟲冷凍后制成的全蠶粉，是目前開(kāi)發(fā)的較好的家蠶幼蟲體保健品。家蠶是世界上飼養(yǎng)最多的昆蟲，利用家蠶幼蟲栽培北蟲草有著豐富的可利用資源。蠶幼蟲較蛹所需時(shí)間短，節(jié)省勞動(dòng)力，成本低，利用家蠶幼蟲栽培北蟲草不僅可取得顯著的社會(huì)與經(jīng)濟(jì)效益，而且也可為蠶業(yè)的綜合利用開(kāi)拓一個(gè)新領(lǐng)域，推動(dòng)蠶桑產(chǎn)業(yè)，從而帶動(dòng)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，但目前蠶蟲草規(guī)模化生產(chǎn)困難、僵化率低是影響蠶蟲草產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要障礙。野生的冬蟲夏草不僅資源匱乏，而且人工培育困難，而蛹蟲草的人工培育比較成功。目前生產(chǎn)上主要是采用大米和小麥或柞蠶蛹為寄主培養(yǎng)，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值低于以家蠶幼蟲為寄主的蠶蟲草。

現(xiàn)有技術(shù)多以家蠶幼蟲為寄主的蛹蟲草子實(shí)體及其培育方法”采用4～5齡家蠶幼蟲注射液體菌種培育出蠶蟲草。但其大多采用注射的方式進(jìn)入蟲草菌植入的方式進(jìn)行，植入效率低，存在僵化率波動(dòng)幅度大，平均僵化率低，蠶蟲草帶有多種其他微生物，不利于后續(xù)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)利用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的主要目的在于提供一種通過(guò)有性繁殖菌種將家蠶培育成蠶蟲草的方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。

為實(shí)現(xiàn)前述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案包括：

本發(fā)明實(shí)施例提供了一種通過(guò)有性繁殖菌種將家蠶培育成蠶蟲草的方法，包括：

(1)采用有性繁殖的方式培養(yǎng)蠶蟲草母種，并制備形成菌液：選擇子囊果孢子的子座長(zhǎng)度為4-5cm的蟲草，使其在無(wú)菌條件下彈射出孢子，孢子落入PDA培養(yǎng)基中形成菌種；將形成的菌種于液態(tài)培養(yǎng)基中形成菌絲，將生長(zhǎng)有菌絲的液態(tài)培養(yǎng)基稀釋形成懸浮液，之后將所述懸浮液與殼聚糖復(fù)合物混合形成噴淋液；

(2)選擇4齡第6天到5齡第1-2天的蠶蟲，并采用乙醇和丙三醇的混合液消毒吹干，將消毒后的蠶蟲轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)室中采用表面形成有所述噴淋液的桑葉喂養(yǎng)3-5天，并采用所述懸浮液保持培養(yǎng)室內(nèi)的濕度為65-70％，保持培養(yǎng)室內(nèi)的溫度為18-21℃；

(3)之后將感染的蠶蟲取出置入發(fā)菌室并黑暗培養(yǎng)5-7天，黑暗培養(yǎng)的初始溫度為16-18℃，之后以每天增加1℃的速度增加至21-23℃；黑暗培養(yǎng)的環(huán)境濕度為65-70％；

(4)將黑暗處理后的蠶蟲置于白天20-24℃、夜間10-14℃的光亮環(huán)境下轉(zhuǎn)色培養(yǎng)，直至蠶蟲表面呈透明黃色，所述培養(yǎng)環(huán)境的濕度為65-70％；

(5)將轉(zhuǎn)色培養(yǎng)后的蠶蟲于20-23℃、濕度為80-85％的環(huán)境中生長(zhǎng)30-35天，至蠶蟲長(zhǎng)出子實(shí)體，子實(shí)體生長(zhǎng)至4＝5cm后即可采摘

進(jìn)一步的，所述的方法包括：以所述懸浮液浸泡桑葉0.5-2h后，向所述桑葉噴淋所述噴淋液。