[發明專利]一種重組解脂耶氏酵母脂肪酶及其表達菌株與應用

在審

• 申請號: 201810259811.1
• 申請日: 2018-03-27
• 公開（公告）號: CN108517329A
• 公開（公告）日: 2018-09-11
• 發明（設計）人: 費輝;錢世超;吳振舉
• 申請（專利權）人: 杭州柏普泰生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/75
• 分類號: C12N15/75;C12N9/20;A23K20/189;C12R1/125
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 黃歡娣;邱啟旺

1.一種重組解脂耶氏酵母脂肪酶表達菌株，其特征在于，由下述方法制得：

(1)將脂肪酶基因連接至表達載體上，獲得重組質粒；所述脂肪酶基因具有如SEQ IDNO:1所示的核苷酸序列；

(2)將重組質粒轉化入枯草芽孢桿菌中，挑選陽性克隆，獲得重組解脂耶氏酵母脂肪酶表達菌株。

2.如權利要求書所述的表達菌株，其特征在于，所述載體為pHT43。

3.如權利要求書所述的表達菌株，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌為WB800N。

4.一種重組解脂耶氏酵母脂肪酶，其特征在于，以權利要求1獲得的表達菌株為發酵菌株進行液體發酵，制備脂肪酶。

5.根據權利要求4所述的脂肪酶，其特征在于，所述發酵方法為：將表達菌株置于裝液量20-40％的培養搖瓶中，在200～220rpm的轉速下以搖床培養，培養溫度37℃、培養時間6～16h，培養基中各成分含量為：淀粉0.15wt％、葡萄糖0.5wt％、尿素0.1wt％、磷酸氫二鉀0.3wt％、磷酸二氫鉀0.15wt％、硫酸鎂0.05wt％、酵母膏0.02wt％、氯化鐵0.01wt％、碳酸鈣0.01wt％、豆粕1wt％、30.8mg/L濃度的硫酸錳溶液0.1vol％。

6.根據權利要求5所述的脂肪酶，其特征在于，培養搖瓶的裝液量為30％。

7.根據權利要求6所述的脂肪酶，其特征在于，培養時間為16h，轉速為200rpm。

8.一種權利要求4所述的重組解脂耶氏酵母脂肪酶作為飼料添加劑的應用。