[發明專利]葡萄霜霉病菌離體保存方法

在審

• 申請號: 201810252937.6
• 申請日: 2018-03-26
• 公開（公告）號: CN108485978A
• 公開（公告）日: 2018-09-04
• 發明（設計）人: 宋雙;姜彩鴿;張怡;王國珍;樊仲慶;張華普
• 申請（專利權）人: 寧夏農林科學院植物保護研究所（寧夏植物病蟲害防治重點實驗室）
• 主分類號: C12N1/04
• 分類號: C12N1/04;C12R1/645
• 代理公司: 寧夏合天律師事務所 64103
• 代理人: 楊麗坤;孫彥虎

1.一種霜霉病菌離體保存方法，其特征在于：將離體的霜霉病菌包埋在瓊脂粉中后置于低于-20℃的環境保存。

2.根據權利要求1所述的霜霉病菌離體保存方法，其特征在于：置于-80℃的環境保存。

3.根據權利要求2所述的霜霉病菌離體保存方法，其特征在于，所述離體的霜霉病菌獲得的步驟為：采集生長良好且感染霜霉病的單斑病葉，沖洗掉病葉表面雜物和原有的霜霉病菌霉層，然后將病葉置于鋪有濕潤紗布或濾紙的容器內，葉片背面朝上，用浸濕的棉花包裹葉柄，用濾紙吸干病葉表面殘留的水珠，保鮮膜封住容器開口，蒙上黑布置于室溫條件下保濕培養，待到病葉上生長出新的白色霜霉層后，用消毒后的剪刀將帶有病斑的病葉剪下，得到離體的霜霉病菌。

4.根據權利要求3所述的霜霉病菌離體保存方法，其特征在于：所述沖洗掉表面殘留的霜霉病菌霉層過程使用的是無菌蒸餾水；所述紗布、濾紙、容器、棉花均經過消毒處理，達到無菌狀態；所述蒙上黑布置于室溫條件下保濕培養過程是置于20℃±2℃，濕度90％以上，黑暗的條件下保濕培養24～36h。

5.根據權利要求1～4中任意一項所述的霜霉病菌離體保存方法，其特征在于：所述保存時間不超過120天；且最佳保存時間不超過90天。

6.一種葡萄霜霉病菌離體保存方法，其特征在于：將離體的葡萄霜霉病菌包埋在瓊脂粉中后置于低于-20℃的環境保存。

7.根據權利要求6所述的葡萄霜霉病菌離體保存方法，其特征在于：置于-80℃的環境保存。

8.根據權利要求7所述的葡萄霜霉病菌離體保存方法，其特征在于，所述離體的葡萄霜霉病菌獲得的步驟為：采集生長良好且感染葡萄霜霉病的單斑病葉，沖洗掉病葉表面雜物和原有的葡萄霜霉病菌霉層，然后將病葉置于鋪有濕潤紗布或濾紙的容器內，葉片背面朝上，用浸濕的棉花包裹葉柄，用濾紙吸干病葉表面殘留的水珠，保鮮膜封住容器開口，蒙上黑布置于室溫條件下保濕培養，待到病葉上生長出新的白色霜霉層后，用消毒后的剪刀將帶有病斑的病葉剪下，得到離體的葡萄霜霉病菌。

9.根據權利要求8所述的葡萄霜霉病菌離體保存方法，其特征在于：所述沖洗掉表面殘留的葡萄霜霉病菌霉層過程使用的是無菌蒸餾水；所述紗布、濾紙、容器、棉花均經過消毒處理，達到無菌狀態；所述蒙上黑布置于室溫條件下保濕培養過程是置于20℃±2℃，濕度90％以上，黑暗的條件下保濕培養24～36h。

10.根據權利要求7～9中任意一項所述的葡萄霜霉病菌離體保存方法，其特征在于：所述保存時間不超過120天；且最佳保存時間不超過90天。