[發明專利]一種測定植物中多種激素的方法

在審

• 申請號: 201810245399.8
• 申請日: 2018-03-23
• 公開（公告）號: CN108535373A
• 公開（公告）日: 2018-09-14
• 發明（設計）人: 胥倩;緹松
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 董芙蓉

1.一種測定植物中多種激素的方法，包括：提取待測植物激素；其特征在于，所述提取待測植物激素的過程為：

將待測植物樣品于液氮中研磨至粉碎，得到粉碎樣品；

向粉碎樣品中加入丙酮與檸檬酸的混合提取液和內標物，4℃搖床3h，得到一次混合物；

將所述一次混合物置于通風櫥內，加蓋錫箔紙過夜后得到二次混合物；

向所述二次混合物中加入乙醚，第一次震蕩后進行第一次離心分離，留取第一上清液；

將所述第一上清液移至一新離心管內抽真空至干，得到一次干粉狀殘留物；

向取完上清液后的混合物中加入乙醚，第二次震蕩后進行第二次離心分離，留取第二上清液；

將所述第二上清液移至一次干粉狀殘留物所在離心管內，抽真空至干，得到二次干粉狀殘留物；

所述干粉混合物經甲醇重懸后，再經微米濾頭過濾，最后采用高效液相色譜-質譜聯用方法進行測定分析，同時獲得多種植物激素的含量。

2.如權利要求1所述的一種測定植物中多種激素的方法，其特征在于，所述高效液相色譜的液相條件：

色譜柱：Thermo HYPERSIL GOLD C18色譜柱(2.1×100,3um)；

柱溫：35℃；

流動相：A:0.1％甲酸水，B:甲醇；

洗脫梯度：0-0.2min，A＝90％；0.2-6min，A遞減至10％；6-8min，A＝10％；8-8.1min，A遞增至90％；8.1-10min,A＝90％

進樣體積：7μl。

3.如權利要求1所述的一種測定植物中多種激素的方法，其特征在于，所述質譜的條件：

噴霧電壓：2500v

鞘氣：40Arb

輔助氣：12Arb

霧化溫度：317℃

離子傳輸管溫度：333℃。

4.如權利要求1所述的一種測定植物中多種激素的方法，其特征在于，所述待測植物樣品的重量為95-105mg，所述混合提取液是由丙酮與50mmoL/L檸檬酸溶液組成，丙酮與檸檬酸溶液的體積比為70:30，每樣品使用量為1.5mL，所加入對應目標激素的內標物的質量為20納克。

5.如權利要求4所述的一種測定植物中多種激素的方法，其特征在于，所述乙醚的加入量為700μL，第一次離心和第二次離心的轉速均為12000rpm，離心時間均為5min。

6.如權利要求1所述的一種測定植物中多種激素的方法，其特征在于，所述植物的多種激素分別為：茉莉酸、水楊酸、脫落酸、異亮氨酸化茉莉酸、OPDA及生長素。