[發明專利]一種同時測定血漿中血必凈注射液有效成分的方法

有效

• 申請號: 201810241176.4
• 申請日: 2018-03-22
• 公開（公告）號: CN108508107B
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 潘桂湘;王獻瑞;王曉明;郭亞卿;胡鳳英;袁圓;朱彥
• 申請（專利權）人: 天津中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/54
• 代理公司: 太原倍智知識產權代理事務所(普通合伙) 14111
• 代理人: 張宏

本發明涉及一種同時測定血漿中血必凈注射液有效成分的方法，所述有效成分包括迷迭香酸、芍藥苷、氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、芍藥內酯苷、羥基紅花黃色素A。其步驟包括向待測血漿樣品中加入抗氧化劑、有機酸和內標溶液，混勻，所述有機酸為甲酸或乙酸中的一種，內標溶液為氯霉素溶液，氯霉素溶液濃度為1～5μg·mL^?1；加入極性有機溶劑，混勻，離心，去除蛋白；吸取有機溶液層，揮干；加入30～50％甲醇水溶液復溶，混勻，離心，取上清液；采用液相色譜串聯質譜法，多反應監測掃描。該方法專屬性好、靈敏度高，精密度、準確度、提取回收率、基質效應和穩定性均達到了體內藥物分析的要求。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，具體而言，是一種同時測定血漿中血必凈注射液有效成分的方法。

背景技術

血必凈注射液是由古方血府逐瘀湯精煉而成的現代復方中藥，由紅花、赤芍、丹參、當歸、川芎五味中藥組成，具有活血化瘀、清熱涼血、潰散毒邪等功效。臨床主要用于治療全身炎癥反應綜合征(SIRS)、膿毒癥(Sepsis)、多器官功能障礙綜合癥(MODS)等。血必凈注射液可通過抗炎、抗血小板聚集、促血管新生等作用對膿毒癥疾病的發生、發展過程進行干預和阻斷，降低膿毒癥發生率和死亡率，體現中藥多成分、多途徑、多靶點的特點。

目前血必凈注射液的研究主要集中在藥理作用機制探討和臨床療效觀察與評價等方面。但藥物成分入血后存在基質干擾嚴重，血藥濃度低達不到檢測限等問題，采用現有文獻報道的針對血必凈注射液制劑的質量控制的測定方法無法滿足生物樣品的測定。因此，建立一種能夠測定血液中血必凈多個有效成分的分析方法，尤其是同時測定體內暴露程度較高的羥基紅花黃色素A、芍藥苷、芍藥內酯苷，對提高臨床合理用藥，后期對擴大藥品適應癥范圍的研究具有積極意義。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種同時測定血漿中血必凈注射液有效成分的方法，同時測定血漿中血必凈注射液有效成分迷迭香酸(RA)、芍藥苷(PE)、氧化芍藥苷(Oxy-PE)、苯甲酰芍藥苷(Ben-PE)、芍藥內酯苷(AF)和羥基紅花黃色素A(HSYA)，該方法具有檢測結果準確、靈敏度高、方法穩定的特點。

為解決以上技術問題，本發明所述的一種同時測定血漿中血必凈注射液有效成分的方法，所述有效成分包括迷迭香酸、芍藥苷、氧化芍藥苷、苯甲酰芍藥苷、芍藥內酯苷、羥基紅花黃色素A，包括步驟：

(1)樣品的制備和(2)采用液相色譜串聯質譜法，多反應監測掃描；

所述步驟(1)包括：

a)向待測血漿樣品中加入抗氧化劑、有機酸和內標溶液，混勻，所述有機酸為甲酸或乙酸中的一種，內標溶液為氯霉素溶液，氯霉素溶液濃度為1～5μg·mL^-1；

b)加入極性有機溶劑，混勻，離心，去除蛋白；

c)吸取有機溶液層，揮干；

d)加入30～50％甲醇水溶液復溶，混勻，離心，取上清液；

所述步驟(2)液相色譜條件為：色譜柱為C18柱；流動相A為水或含有0.05～0.3vt.％的甲酸水溶液，流動相B為甲醇或含0.05-0.1vt.％甲酸的乙腈，流速為0.2～0.5mL·min^-1，梯度線性洗脫，柱溫設定為15～40℃。