[發明專利]一種人參莖葉蛋白的提取分離方法

有效

• 申請號: 201810238528.0
• 申請日: 2018-03-22
• 公開（公告）號: CN108191952B
• 公開（公告）日: 2021-11-23
• 發明（設計）人: 胡良海;張貴元;李瀟影;楊曉敏
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 王恩遠

本發明的一種人參莖葉蛋白的提取分離方法，屬于蛋白質分離純化的技術領域。以人參莖葉為原料提取人參蛋白，經有機溶劑除雜過程，兩次近中性緩沖液浸提過程，合并兩次浸提的上清液，再經冷丙酮靜置及蒸餾水重溶，冷凍干燥得到人參蛋白粉。本發明的方法制備方法簡便，提取率高；人參莖葉價格低廉，利用人參莖葉提取人參蛋白能夠降低生產成本，達到更高的經濟效益；適用于工業化生產，產品可用于功能食品的開發。

技術領域

本發明屬于蛋白質分離純化的技術領域，涉及一種人參莖葉蛋白的提取方法。

背景技術

人參屬于五加科人參屬，為多年生宿根草本植物，古代人參的雅稱為黃精、地精、神草。人參主要產于我國東北地區，是“關東三寶”之一，是馳名中外、老幼皆知的名貴藥材和保健佳品，被稱之為“百草之王”。

人參，包括根、莖、葉，全身是中藥之寶。人參含有許多有效藥用成分，包括人參多糖、皂苷、脂肪酸、甾醇、維生素、揮發油、蛋白質、多肽等多種成分。近年來，人們對于人參成分的分離純化進行了很多的研究，并取得了很大的進展，但是對于人參中蛋白質的研究涉及較少。

蛋白質在生命活動的過程中起著十分重要的作用，存在于所有的動植物中。目前人們主要從人參根部提取人參蛋白，對于從人參莖葉中提取人參蛋白的研究較少。

發明內容

本發明的目的是開發一種新的簡便的、提取率高的提取人參蛋白的方法：以人參莖葉為原料，通過有機溶劑除雜、緩沖液浸提、冷丙酮靜置、蒸餾水重溶、真空冷凍干燥等方法提取人參莖葉蛋白。

提取人參莖葉蛋白的具體技術方案如下。

一種人參莖葉蛋白的提取方法，有蛋白提取過程、冷丙酮靜置及蒸餾水重溶過程和后處理過程；

所述的蛋白提取過程，是將人參莖葉粉末加入到pH＝7.4～7.8的磷酸鹽緩沖液中浸提5～10小時，離心得到上清液和沉淀，其中人參莖葉粉末與磷酸鹽緩沖液的質量體積比(g/mL)為1:10～20；再將沉淀加入到pH＝7.4～7.8的磷酸鹽緩沖液中浸提5～10小時，離心收集上清液，其中沉淀與磷酸鹽緩沖液的質量體積比(g/mL)為1:10～20；合并兩次的上清液即為人參莖葉蛋白溶液；

所述的冷丙酮靜置及蒸餾水重溶過程，是在人參莖葉蛋白溶液中加入5～10倍體積的冷丙酮，在-20℃下靜置3～10小時，離心棄上清，將沉淀加入到蒸餾水中重新溶解，得到人參莖葉總蛋白溶液，其中蒸餾水用量為人參莖葉蛋白溶液體積的0.2～0.5倍；

所述的后處理過程，是將人參莖葉總蛋白溶液在-20℃下預冷5小時，再進行真空冷凍干燥，得到人參莖葉蛋白粉。

上述的磷酸鹽緩沖液，可以是商品的1X PBS緩沖液，也可以自行配制。

在蛋白提取過程之前最好先進行除雜過程，所述的除雜過程，是將人參莖葉粉末加入到有機溶劑中，攪拌3～5小時，過濾保留濾渣，之后再將濾渣加入到pH＝7.4～7.8的磷酸鹽緩沖液中浸提；所述的有機溶劑，是丙酮、無水乙醇或正己烷。

在除雜過程中，人參莖葉粉末與有機溶劑的質量體積比(g/mL)為1:10。優選的有機溶劑，是正己烷。

在冷丙酮靜置及蒸餾水重溶過程中，所述的冷丙酮，可以是-20℃的丙酮。

所述的蛋白提取過程，優選的每次浸提時間均為10小時，優選的人參莖葉粉末、沉淀與磷酸鹽緩沖液的質量體積比(g/mL)均為1:10；所述的冷丙酮靜置及蒸餾水重溶過程，優選在人參莖葉蛋白溶液中加入5倍體積的冷丙酮在-20℃下靜置3小時。

本發明方法可以得到人參莖葉蛋白粉；并且制備方法簡便，提取率高，適用于工業化生產，可以用于功能食品的開發；人參莖葉價格比較低廉，利用人參莖葉提取人參蛋白能夠降低生產成本，達到更高的經濟效益。

附圖說明