[發(fā)明專利]一種含硒植物蛋白的提取方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810234022.2
• 申請日: 2018-03-21
• 公開（公告）號: CN108546280A
• 公開（公告）日: 2018-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田歡;魏昌華;鮑征宇
• 申請（專利權(quán)）人: 中國地質(zhì)大學(xué)（武漢）
• 主分類號: C07K1/14
• 分類號: C07K1/14;C07K1/30;C07K1/36
• 代理公司: 武漢知產(chǎn)時(shí)代知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42238
• 代理人: 馮必發(fā);金慧君

1.一種含硒植物蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1.預(yù)處理遏藍(lán)菜，得到高聚硒的粉末樣品；

S2.向粉末樣品中加入5-15倍體積的提取劑，置于25℃恒溫水浴振蕩器中振蕩30-90min，振蕩速率為200r/min，混合均勻，抽濾，取上清液，過5μm水系濾膜，得到提取液，4℃冷藏保存；

S3.調(diào)節(jié)提取液的pH為3.5，并攪拌均勻，加入0.4-0.8倍提取液體積的預(yù)冷的飽和鹽溶液，邊加邊攪拌，4℃靜置，至粗蛋白沉淀析出；

S4.將析出粗蛋白沉淀的提取液置于高速冷凍離心機(jī)中離心10min，溫度為4℃，離心速率為10000r/min，棄上清液，得到下層蛋白沉淀；

S5.向下層蛋白沉淀中再次加入提取劑復(fù)溶，并攪拌至完全溶解，得到純化的蛋白溶液；

S6.將蛋白溶液轉(zhuǎn)移至透析袋中，封口，置于超純水中進(jìn)行透析24h，期間每隔6小時(shí)換一次超純水；

S7.檢驗(yàn)是否透析完全，若未透析完全，重復(fù)步驟S6，若透析完全，將透析袋中的液體轉(zhuǎn)移出來，則得到含硒蛋白溶液，4℃保存；

S8.調(diào)節(jié)含硒蛋白溶液的pH為3.5，并攪拌均勻，加入0.4-0.8倍含硒蛋白溶液體積的預(yù)冷的飽和鹽溶液，邊加邊攪拌，4℃靜置，至含硒蛋白沉淀析出；

S9.高速冷凍離心機(jī)離心10min，溫度為4℃，離心速率為10000r/min，棄上清液，得到下層含硒蛋白沉淀,即得到含硒植物蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法，其特征在于，所述步驟S1中，取遏藍(lán)菜的地上部分,洗凈，在50℃烘干至恒重，粉碎，過100目篩，即得到高聚硒的粉末樣品。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法，其特征在于，所述提取劑為超純水、0.1mo/L NaOH溶液、0.1mo/L HCl溶液、0.5mol/L NaCl或0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，磷酸鹽緩沖液的pH為6.6-7.4。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法，其特征在于，所述步驟S3和S8中，用醋酸調(diào)節(jié)pH，飽和鹽溶液為飽和硫酸銨溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法，其特征在于，所述步驟S5中，向下層蛋白沉淀中再次加入提取劑復(fù)溶，并用玻璃棒攪拌，若無法完全溶解，則離心，去除不溶物。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含硒植物蛋白的提取方法，其特征在于，所述步驟S7中，取透析液2ml，用氯化鋇溶液檢驗(yàn)是否透析完全，無沉淀產(chǎn)生則透析完全，有沉淀產(chǎn)生則未透析完全。