[發明專利]衢枳殼HPLC指紋圖譜的建立方法、標準指紋圖譜及應用

在審

• 申請號: 201810229362.6
• 申請日: 2018-03-20
• 公開（公告）號: CN108445124A
• 公開（公告）日: 2018-08-24
• 發明（設計）人: 張文婷;岳超;黃琴偉;趙維良;宋劍鋒;郭增喜;馮超
• 申請（專利權）人: 浙江省食品藥品檢驗研究院
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86;G01N30/74;G01N30/06
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;朱思蘭

1.一種衢枳殼HPLC指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

(1)供試品溶液的制備

稱取衢枳殼供試品，按料液比1：50～100加入體積分數50％甲醇水溶液中，超聲處理10～30min，冷卻至室溫，離心，取上清液，過濾，所得濾液即為供試品溶液；

(2)色譜分析

精密吸取步驟(1)所得供試品溶液，注入高效液相色譜儀，檢測得到供試品的指紋圖譜；

所述色譜分析條件為：色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動相由乙腈和體積分數0.1％～0.3％甲酸水溶液組成，采用梯度洗脫，紫外檢測波長為330～360nm。

2.如權利要求1所述的衢枳殼HPLC指紋圖譜的構建方法，其特征在于，步驟(1)中，所述衢枳殼供試品為衢枳殼藥材或衢枳殼飲片粉末。

3.如權利要求1所述的衢枳殼HPLC指紋圖譜的構建方法，其特征在于，步驟(1)中，所述過濾采用0.45μm的尼龍微孔濾膜；

4.如權利要求1所述的衢枳殼HPLC指紋圖譜的構建方法，其特征在于，步驟(2)中，所述色譜分析條件為：

色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動相由乙腈和體積分數0.1％～0.3％甲酸水溶液組成，采用梯度洗脫，柱溫25～40℃，紫外檢測波長320～350nm，流速1.0ml/min，分析時間60～70min，進樣量5～10μL。

5.如權利要求1所述的衢枳殼HPLC指紋圖譜的構建方法，其特征在于，步驟(2)中，所述色譜分析條件為：

色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動相由乙腈和體積分數0.1％甲酸水溶液組成，采用梯度洗脫，洗脫程序如表1所示：

表1

柱溫30℃，紫外檢測波長330nm，流速1.0ml/min，分析時間70min，進樣量5～10μL。

6.衢枳殼標準指紋圖譜，其特征在于，所述衢枳殼標準指紋圖譜按如下方法獲取：

將若干個批次的衢枳殼供試品按照權利要求1～5任一項所述的方法操作，得到液相色譜圖，導入國家藥典委員會提供的中藥指紋圖譜相似度評價軟件，由軟件自動生成衢枳殼標準指紋圖譜。

7.如權利要求6所述的衢枳殼標準指紋圖譜，其特征在于，具有19個共有峰，確定了其中9個峰的化學成分，分別為：

蕓香柚皮苷4號峰、柚皮苷5號峰、橙皮苷7號峰、新橙皮苷8號峰、橘皮內酯水合物9號峰、木犀草素10號峰、橘皮內酯13號峰、川陳皮素16號峰、桔皮素18號峰；

以柚皮苷5號峰為參照峰，19個共有峰的保留時間和相對峰面積如表2所示：

表2 標準指紋圖譜共有峰保留時間和相對峰面積

8.如權利要求6所述的衢枳殼標準指紋圖譜在衢枳殼質量控制或真偽鑒別中的應用。

9.如權利要求8所述的應用，其特征在于，所述應用的方法為：

將衢枳殼樣品按照權利要求1～5任一項所述的方法操作，獲得樣品的指紋圖譜，以標準指紋圖譜作為對照，采用國家藥典委員會提供的中藥指紋圖譜相似度評價軟件，以全譜峰匹配模式對樣品進行指紋圖譜測定及相似度計算，以相似度不低于0.90為標準判斷樣品是否合格。