[發明專利]一種快速鑒定川山茶傳統名品的方法

有效

• 申請號: 201810200510.1
• 申請日: 2018-03-12
• 公開（公告）號: CN108410967B
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發明（設計）人: 權俊萍;張紹林;韓國勇;劉家艷;劉宇;田波;沈薛潔
• 申請（專利權）人: 重慶市南山植物園管理處
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686
• 代理公司: 重慶晶智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 50229
• 代理人: 李靖

本發明涉及一種快速鑒定川山茶傳統名品的方法，本發明提供了3對SSR標記引物P06、A54和A80，并將它們應用于品種鑒定。本發明利用3對SSR引物對10個川山茶品種的DNA進行PCR擴增及聚丙烯酰胺凝膠電泳后銀染檢測。1、本發明得到的SSR標記圖譜特異性條帶清晰、非特異帶少、多態性高。2、本發明選取的3對SSR引物可以同時將10個川山茶品種全部一一區分，識別品種較多。3、本方法與傳統經驗鑒別方法相比客觀性更強，更加準確。4、本方法與觀測數據定性或者定量綜合判定方法相比，能夠節約時間和成本，對川山茶品種的鑒別提供了更加十分廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及種質鑒定技術，建立了一種針對川山茶傳統名品快速準確鑒別的方法，屬于分子生物學技術領域。

背景技術

山茶是山茶科Theaceae山茶屬Camellia植物，中國十大傳統名花，世界名貴花卉之一，是我國西南及長江流域以南較為重要的高觀賞性園林綠化樹種。山茶栽培歷史悠久，很多品種多為營養體變異獲得，品種間的形態學差異大多較為細微，有些品種即使是專業人員也難以從表型性狀上明確的加以區分，給種質保存、交流、品種選育及生產方面均帶來很大困擾。尤其是近幾年隨著山茶種苗產業的逐漸興起，種苗市場流通日益頻繁，出現了一些因品種錯誤而造成的苗木糾紛，特別在一些傳統名貴品種的交易中尤為突出。建立快速、高效、準確的山茶名品鑒定技術，可成為保護優良品種交流、研究及推廣應用的重要技術支撐。

川山茶為茶花五大栽培類群中的重要一支，在巴蜀地區已有2000多年的栽培歷史，有很多優秀的古老傳統名品，包括白洋片、川瑪瑙、胭脂鱗、紫金冠、金頂大紅、七心紅、川牡丹、醉楊妃、重慶紅等等。重慶市南山植物園建有世界唯一的川山茶種質資源基地，收集保育有川山茶古老品種100余種。

苗木品種的鑒定，一是可通過有經驗的專業技術人員根據經驗從外觀形態上加以判定，這往往會造成主觀性帶來的差錯；二是通過觀測數據定性或者定量綜合判定，但往往需要一個生長季或某個特定生長發育時期(花、果實、種子)的數據觀測收集，山茶種子苗從播種到開花往往需要5年左右的時間，因此缺乏時效性和準確性，且表型性狀易受栽培管理和環境條件的影響；三是通過DNA分子標記指紋圖譜進行鑒定，具有即時、高效、直觀、準確的特點。

隨著分子生物學的發展，各種DNA分子標記技術不斷涌現，檢測技術漸趨完善，為實現山茶品種的早期、快速和準確鑒定提供了新途徑SSR(Simple sequence repeats，簡單序列重復)是近年來廣泛使用于各類植研究的分子標記技術，無需預知物種基因組序列，具有實驗操作簡單、穩定性好、多態性豐富等優點，在進行植物遺傳多樣性分析、種質鑒定、遺傳連鎖圖的構建、基因連鎖標記的尋找與基因定位和比較基因組學研究等方面得到了很好的應用，目前在山茶中的研究，主要側重于對某類山茶資源材料的親緣關系方面的探討。將該技術用于川山茶地方名品的種質鑒定方面的研究未見報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種快速鑒定川山茶傳統名品的方法，本方法利用SSR分子標記指紋圖譜對山茶品種進行鑒定，可快速鑒定10種川山茶傳統名品。

本發明的一種快速鑒定川山茶傳統名品的方法，所用的SSR標記引物分別為：P06它由核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的下游引物組成，A54它由核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ IDNO.4所示的下游引物組成，A80，它由核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的上游引物和核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示的下游引物組成。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的：

一種快速鑒定川山茶傳統名品的方法，其特征在于，該方法包含下列步驟：