[發明專利]一種快速鑒定川山茶傳統名品的方法

有效

• 申請號: 201810200510.1
• 申請日: 2018-03-12
• 公開（公告）號: CN108410967B
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發明（設計）人: 權俊萍;張紹林;韓國勇;劉家艷;劉宇;田波;沈薛潔
• 申請（專利權）人: 重慶市南山植物園管理處
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686
• 代理公司: 重慶晶智匯知識產權代理事務所(普通合伙) 50229
• 代理人: 李靖

1.一種快速鑒定川山茶傳統名品的方法，其特征在于：

該方法包含下列步驟：

（1）取樣：樣品來自重慶市南山植物園國家山茶種質資源庫中保育的成年健康植株，共包括川山茶10個傳統名品，分別為：白洋片、川瑪瑙、胭脂鱗、紫金冠、金頂大紅、七心紅、川牡丹、醉楊妃、重慶紅、白玉片；

（2）DNA提取：提取山茶基因組DNA；

（3）以步驟（2）提取的川山茶基因組DNA為模板，將3對SSR標記引物用于PCR擴增及電泳；

（4）統計電泳后的DNA指紋圖譜，建立“0”、“1”矩陣表，若兩品種間差異位點數量≥2，則判定兩品種為不同品種；

所述的3對SSR標記引物分別為P06、A54和A80，所述P06由核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游引物和核苷酸序列如 SEQ ID NO.2 所示的下游引物組成，所述A54由核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的上游引物和核苷酸序列如 SEQ ID NO.4 所示的下游引物組成，所述A80由核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的上游引物和核苷酸序列如 SEQ ID NO.6 所示的下游引物組成。

2.如權利要求1所述的一種快速鑒定川山茶傳統名品的方法，其特征在于：所述PCR反應采用20μL擴增體系：

50ng模板DNA、2.5 mmol·L^-1 Mg²⁺、0.05mmol·L^-1 dNTPs、0.2μmol·L^-1引物和

0.5U TaqDNA聚合酶；

所述PCR擴增條件：94℃ 5min，94℃ 30s，52℃ 30s，72℃ 30s，38次循環，72℃ 最后延伸5min，擴增完后4℃保存。