[發明專利]一種八月瓜莖段愈傷組織誘導培養方法有效
| 申請號： | 201810188629.1 | 申請日： | 2018-03-07 |
| 公開（公告）號： | CN108184672B | 公開（公告）日： | 2021-06-15 |
| 發明（設計）人： | 李安定;席培宇;彭熙;張麗敏;蔡國俊;張建利;龍秀琴;王濟紅 | 申請（專利權）人： | 貴州省山地資源研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 貴陽中工知識產權代理事務所 52106 | 代理人： | 劉安寧 |
| 地址： | 550001*** | 國省代碼： | 貴州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 八月 瓜莖段愈傷 組織 誘導 培養 方法 | ||
1.一種八月瓜莖段愈傷組織誘導培養方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)外植體消毒：采集剛萌發7～15d的八月瓜新梢，去掉葉片，取帶腋芽莖段做外植體；沖洗干凈后，用5000mg.L-1維生素C蒸餾水溶液浸泡50min，然后用3000mg.L-1高錳酸鉀蒸餾水溶液浸泡30min，用蒸餾水沖洗3～5次，再用1000mg.L-1氯化汞水溶液消毒10min，蒸餾水沖洗5次；
(2)植物細胞組織培養各階段的基本培養基均為：1/2MS+12g.L-1瓊脂+30g.L-1蔗糖+1.5g.L-1活性炭+2.0g.L-1聚乙烯吡咯烷酮，pH值6.5；各階段培養條件為：溫度24℃～26℃，光照為1500～2000Lux，光照時間為12～14h/d；
(3)腋芽初誘導培養：將消毒后的外植體按生長極性豎立接種在基本培養基+0.8mg.L-16-糠氨基嘌呤+0.005mg.L-1萘乙酸的腋芽初誘導培養基上；
(4)愈傷組織誘導培養：將初誘導培養產生的腋芽剪切成長度0.5cm的小段后接種于基本培養基+0.5mg.L-16–芐氨基嘌呤+0.1mg.L-12,4-二氯苯氧乙酸+0.05mg.L-1～0.1mg.L-1萘乙酸的愈傷組織培養基上，可產生直徑1.0cm的綠色疏松愈傷組織；
(5)繼代增殖培養：用鑷子輕輕將愈傷組織分成直徑0.5cm的小塊后接種在基本培養基+2.5mg.L-1噻苯隆+0.1mg.L-1吲哚丁酸的繼代增殖培養基上，同時分化愈傷組織和叢生芽，每塊直徑1.5cm，可分化4～5個叢生芽。
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