[發(fā)明專利]一種用于酶聯(lián)免疫試劑盒的組合物以及糖尿病抗體譜檢測試劑盒及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810188203.6
• 申請日: 2018-03-07
• 公開（公告）號: CN108469519B
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發(fā)明（設計）人: 張大準;張永頂;馬偉民;王洪濤;馬新民
• 申請（專利權）人: 深圳市伯勞特生物制品有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/68
• 代理公司: 深圳市深佳知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 44285
• 代理人: 王仲凱

本發(fā)明涉及酶聯(lián)免疫技術領域，公開了一種用于酶聯(lián)免疫試劑盒的組合物以及糖尿病抗體譜檢測試劑盒及其制備方法。本發(fā)明所述組合物包括封閉液和酶標稀釋液；所述封閉液含有BSA、聚乙烯醇、甘露醇、疊氮鈉和磷酸氫二鈉，所述酶標稀釋液含有Tris、檸檬酸、BSA、聚乙二醇、阿拉伯樹膠、甜菜堿和Proclin300。本發(fā)明從酶聯(lián)免疫試劑盒的封閉液和酶標稀釋液入手，通過選擇適宜成分，使得酶聯(lián)免疫試劑盒能夠較長時間保持檢測的穩(wěn)定性。同時，以所述組合物制備的糖尿病檢測試劑盒在具有較佳穩(wěn)定性的基礎上，還能夠?qū)μ悄虿∵M行準確診斷和分型，特別是針對IAA的檢測上，具備較高的陽性率。

技術領域

本發(fā)明涉及酶聯(lián)免疫技術領域，具體涉及一種用于酶聯(lián)免疫試劑盒的組合物以及糖尿病抗體譜檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術

糖尿病(diabetes)是由遺傳因素、免疫功能紊亂、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等等各種致病因子作用于機體導致胰島功能減退、胰島素抵抗等而引發(fā)的糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂綜合征，臨床上以高血糖為主要特點，典型病例可出現(xiàn)多尿、多飲、多食、消瘦等表現(xiàn)，即“三多一少”癥狀。糖尿病在病因，發(fā)病機制和自然病程等方面顯示高度異質(zhì)性，所以糖尿病是一組高血糖疾病的總稱。糖尿病基于病因和發(fā)病機理分為Ⅰ型糖尿病、Ⅱ型糖尿病及其它類型。Ⅰ型糖尿病是以胰島β細胞自身免疫破壞為重要病因的一種疾病，患者體內(nèi)存在一種或多種針對胰島β細胞胰島素合成、轉(zhuǎn)運和分泌的關鍵酶的自身抗體，主要包括胰島細胞抗體(ICA)、胰島素自身抗體(IAA)、谷氨酸脫羧酶抗體(GADA)、酪氨酸磷酸抗體(IA-2A)、羧基肽酶抗體(CPH-A)和鋅轉(zhuǎn)運蛋白8抗體(ZnT8-A)等6種自身抗體。85％～90％患者在首次檢出空腹高血糖時，通常存在一種或多種上述抗體。

蛋白質(zhì)芯片是一種高通量的蛋白功能分析技術，是近年來發(fā)展起來的一項生物檢測技術，這項技術是將蛋白質(zhì)的分析微縮到小型芯片上，利用熒光或酶顯色進行探測，最后用特定的計算機軟件加以分析。依靠ELISA技術，蛋白質(zhì)芯片能夠快速、高通量、定量分析大量的蛋白樣品，以及所需試劑和樣品較少，產(chǎn)品化后價格更低廉等優(yōu)勢，使其迅速成為研究熱點。但是，目前該類試劑盒的穩(wěn)定性并不好。此外，該類試劑盒在檢測糖尿病胰島素自身抗體(IAA)的陽性率上存在不足，陽性率較低，容易漏檢。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種用于酶聯(lián)免疫試劑盒的組合物，使得所述組合物用于制備酶聯(lián)免疫試劑盒時能夠顯著提高試劑盒在低溫和室溫下的穩(wěn)定性，保存時間延長；

本發(fā)明的另外一個目的在于提供上述組合物在制備酶聯(lián)免疫試劑盒中的應用，特別是用于檢測糖尿病的相關試劑盒；

本發(fā)明的另外一個目的在于提供一種包含上述組合物的糖尿病抗體譜檢測試劑盒及其制備方法，使得所述試劑盒在低溫和室溫下具有較長時間的穩(wěn)定性，同時檢測結果具有較高的特異性和敏感性；

本發(fā)明的另外一個目的在于提供一種包含上述組合物的糖尿病抗體譜檢測試劑盒及其制備方法，使得所述試劑盒能夠顯著提高檢測糖尿病胰島素自身抗體(IAA)的陽性率。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：

一種用于酶聯(lián)免疫試劑盒的組合物，包括封閉液和酶標稀釋液；所述封閉液含有BSA、聚乙烯醇、甘露醇、疊氮鈉和磷酸氫二鈉，所述酶標稀釋液含有Tris、檸檬酸、BSA、聚乙二醇、阿拉伯樹膠、甜菜堿和Proclin300。

針對現(xiàn)有酶聯(lián)免疫試劑盒穩(wěn)定較差、保存時間較短的缺陷，本發(fā)明意外發(fā)現(xiàn)了從制備試劑盒的封閉液和酶標稀釋液(用于稀釋酶標抗原或抗體用)入手，通過選擇合適的組分完善兩者的組成，能夠顯著提高酶聯(lián)免疫試劑盒的穩(wěn)定性和保存時間。