[發明專利]一種抗torch-IgM型抗體譜芯片及其制備方法與TORCH檢測的試劑盒

有效

• 申請號: 201810188202.1
• 申請日: 2018-03-07
• 公開（公告）號: CN108398554B
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 張大準;肖川;張永頂;馬偉民;王洪濤;馬新民
• 申請（專利權）人: 深圳市伯勞特生物制品有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/68;G01N21/76
• 代理公司: 深圳市深佳知識產權代理事務所(普通合伙) 44285
• 代理人: 王仲凱

1.一種抗torch-IgM型抗體譜芯片，包被有TORCH檢測相關的病原微生物的抗原的蛋白芯片；所述的芯片的制備方法，用包被緩沖液稀釋TORCH檢測相關的病原微生物的抗原、質控點蛋白和/或參考點蛋白，通過點樣儀以點陣列形式包被于芯片基質上，用封閉穩定劑封閉；所述包被緩沖液為含0.5％的PEG4000、0.02％的Captisol、5％的海藻糖、0.05％的Proclin300和15％的甘油pH9.6的CB緩沖液；所述封閉穩定劑為含1％甘露醇，2％的PVP40000、1％NH₂-PEG、0.05％NaN3的pH7.4的0.01M磷酸氫二鈉溶液。

2.根據權利要求1所述的芯片，所述TORCH檢測相關的病原微生物為弓形蟲(TOX)、巨細胞病毒(CMV)、風疹病毒(RV)、單純皰疹病毒(HSV)、人類微小病毒B19、柯薩奇病毒，梅毒螺旋體、乙肝病毒(HBV)、衣原體中至少一種。

3.根據權利要求1或2所述的芯片，所述蛋白芯片還包含質控點和/或參考點；所述質控點包含至少一個陽性質控點(PC)、至少一個陰性質控點(NC)、至少一個樣品質控點(SC)和/或至少一個酶標質控點(EC)；所述參考點包含不同濃度的參考曲線點(S1-S5)和/或至少一個芯片位置參考點(Loc)。

4.根據權利要求3所述的芯片，所述陽性質控點包被人IgM或包被BSA-DNP偶聯物；所述陰性質控點包被低于反應信號值的微量濃度的人IgM或其他的與TORCH檢測病原微生物無關的蛋白；所述樣品質控點為包被抗人IgM；所述酶標質控點包被人IgM或抗兔的抗體；所述參考曲線點包被不同濃度的人IgM；所述芯片位置參考點包被已知濃度的人IgM溶液。

5.權利要求1-4任意一項所述的芯片的制備方法，用包被緩沖液稀釋TORCH檢測相關的病原微生物的抗原、質控點蛋白和/或參考點蛋白，通過點樣儀以點陣列形式包被于芯片基質上，用封閉穩定劑封閉；所述包被緩沖液為含0.5％的PEG4000、0.02％的Captisol、5％的海藻糖、0.05％的Proclin300和15％的甘油pH9.6的CB緩沖液；所述封閉穩定劑為含1％甘露醇，2％的PVP40000、1％NH₂-PEG、0.05％NaN3的pH7.4的0.01M磷酸氫二鈉溶液。

6.根據權利要求5所述的制備方法，所述包被為2-8℃，靜置包被16-24h；所述芯片基質為酶標反應板、玻璃片、化學膜、多孔硅膠。

7.一種TORCH檢測的試劑盒，包括權利要求1-4任意一項所述的抗torch-IgM型抗體譜芯片。

8.根據權利要求7所述的試劑盒，還包括酶標記物、酶標稀釋穩定劑、樣品稀釋液、洗滌液、顯色液中的至少一種。

9.根據權利要求8所述的試劑盒，所述酶標記物為辣根過氧化物酶標記的抗人IgM抗體；酶標稀釋穩定劑為包含0.05M的檸檬酸、3％-5％的牛血清γ球蛋白、2％-4％的PEG10000、0.05％-0.2％的阿拉伯樹膠1％-2％的甜菜堿、0.05％的Proclin3000的pH7.4的100mM的Tris溶液；樣品稀釋液為包含0.15M NaCl、0.05％Tween20、0.01％酪蛋白的pH7.4的0.02M Tris溶液；洗滌液為包含0.15M NaCl、0.05％Tween20的pH7.4的0.02M Tris溶液；所述顯色液為沉降型TMB。